紫山药多酚的提取.doc

第五章紫山药总酚化合物提取工艺参数优化 5.1引言 山药是一种药食兼用的蔬菜，营养丰富并且具有保健功效，深受消费者青睐。多酚类化合物是山药中重要的功能性成分之一。本文在单因素试验的基础上，采用响应面法研究了乙醇浓度，提取时间、提取温度、液料比等因素对紫山药总酚得率的影响，建立了紫山药总多酚的提取方法二次多项数学模型，优化了紫山药总多酚提取的工艺参数。可为紫山药中的多酚类化合物提取及功能性研究提供基础，也能为其深度开发和废弃物利用提供参考。 5.2材料与方法 5.2.1材料 新鲜紫山药，为2009年11月份购买于浙江省台州市黄岩区的黄岩溪牌紫漪药，运抵本实验室后于室温下(10~20 oC)贮存。没食子酸、福林酚、碳酸钠、乙醇等试剂均为分析纯。 5.2.2仪器与试剂 ShimadzuUV-2550紫外分光光度计；SartoriuSBL310分析天平；蓝天DHG一9240C型全自动电脑干燥箱；佑崎D3V-10倾倒式粉碎机。 5.2.3试验方法 5.2.3.1紫山药粉的制备 新鲜紫山药洗净、去皮、切片，于50oC烘箱内干燥48h，干燥品经粉碎后过筛，在-80oC 条件下贮藏备用。 5.2.3.2标准曲线的制作 采用福林酚比色法(Folin一ciocalteau)进行总酚含量的测定[55]。取0.1g没食子酸标准品，用水溶解并定容至100mL，分别吸取0，5，10，15，20，25mL没食子酸水溶液于50mL容量瓶中定容，依次配成浓度为0，100，200，300，400，500mg/L浓度的没食子酸标准溶液。分别吸取0.2mL标准液于10mL容量瓶中,加入0.8mL水,再加入5mL0.2N的Folin一ciocaheau试剂和4mL饱和的Na2CO3(75g/L)，混合均匀并在室温下暗处平衡2h后，用分光光度计在765nm处测定吸光度值，重复三次，取平均值。以吸光度对没食子酸浓度进行回归，并绘制标准曲线。总酚含量用没食子酸当量GAE(gallieacidequivalent)表示。求得总酚的测定线性回归方程为: Y=O.OO26X+0.0121，决定系数R2=0.9953 (5.1) Y一吸光度值 X一没食子酸标准液(mg/L) 5.2.3.3紫山药总酚提取方法 精确称取紫山药粉(5士0.05)g，加入一定体积和体积分数的乙醇溶液，在一定温度 和时间条件下浸提，提取结束后，将提取液迅速冷却并抽滤,滤液用于总酚含量测定。 5.2.3.4总酚得率 紫山药总酚得率(mg/g)=提取液中的总酚质量(mg)/原料质量(g) (5.2) 5.3结果与分析 5.3.1单因素实验 5.3.1.1乙醇体积分数的影响 固定提取时间为60min,温度为50oC，液料比为20:1,分别用不同体积分数(30%，40%，50%，60%，70%)的乙醇溶液，提取紫山药中的酚类物质。不同体积分数乙醇溶液对紫山药总酚得率的影响如图5.1。结果表明，以40%乙醇溶液为提取溶剂时，紫山药总酚得率最高。 图5.1乙醇体积分数对紫山药总酚提取率的影响 5.3.1.2提取时间的影响 不同提取时间(20min，40min，60min，80min，100min)对紫山药总酚得率的影响，见图5.2。在固定温度为50 oC，液料比为20:1，乙醇体积分数为50%的条件下,随着时间的延长，总酚得率变化并不明显，但在提取时间为40min时达到最大。 图5.2提取时间对紫山药总酚提取率的影响 5.3.1.3提取温度的影响 固定提取时间为60min，液料比为20:1，乙醇体积分数为40%，改变提取温度(30 oC，40 oC ，50 oC ，60 oC ，70 oC)，试验结果如图5.3所示。随着温度的升高,总酚得率上升。考虑到多酚类为热敏性物质，温度过高，会对其产生破坏作用，因此温度最高不超过70 oC。 图5.3提取温度对紫山药总酚提取率的影响 5.3.1.4液料比的影响 以液料比对紫山药总酚得率做单因素试验，试验条件：温度为50 oC，改变液料比(10: 1，15:1,，20：1，25:1,，30:l)，用体积分数50%乙醇提取60min。试验结果见图54。随着液料比的增大,总酚得率增高。这是因为液料比越大,物料与提取溶剂的接触越充分，从而更有利于酚类化合物的溶出。但料液比过高意味着溶剂用量越大，并不经济，而且在实际生产中，料液比过高则后续去溶剂时所消耗的能量也更高，所以并不是越高越好。 图5.4液料比值对紫山药总酚提取率的影响 5.3.2 响应面法优化紫山药总酚提取工艺 5.3.2.1响应面分析及试验结果 根据Box-Benhnlcen模型的中心组合试验设计原理，选取乙