国产血清胆固醇试剂盒测定蛋黄胆固醇的研究.pdfVIP

维普资讯 第 5期 【总第 156J 福 建 轻 纺 2002年 5月 5(Seria】№ 156】 TheLight＆Texti]eIndustriesofFujiml MAY．2002 瞬产血遗摩睡碡溅越盒溯突蛋黄胆嚼碡鸽研宠 檀 东飞，吴国欣 ，杨兆芬 ，蒋家荣，郑向阳 (福建师范大学 生物 I程学院，福建 福州 350007) 摘 要 ：以两种 国产血清胆固醇酶法试剂金 (I、1I)测定蛋黄胆 固醇含量，评价用血清胆 固醇 试剂盒测定食品胆 固醇的可行性 井将此法与 国家标准方法(Feng法)进行比较 其结果是 ：试剂盒 I在胆 固醇 409b~g／管，粗脂肪 8878b~g／管范周 内线性 良好，f1=0．9999，Y 【=0．00390X+0．0040； 试剂盒 Ⅱ在胆 固醇 205~g／管，粗脂肪 4439b~g／管 内线性 良好 ，rⅡ=0．9994．Yl=0．00414X一 0．0005。批 内变异 ：C ·V】=3．286％，c ·V 3774％，批 问变异：c ·vl=4．157％。C ·VⅡ= 4．906％；回收率：I为 97．6～104．O％，1I为 98．38～104．9％。试剂盒法与国称法相关 良好 ；rI= 0．9972，YI=1．049X一2．083；rlJ=09989，Yu=09984X一06266。试 剂盒 酶法 比国标 法省略 了皂 化，再萃取，再抽 干和试剂配制的步骤，而且可 以避免强酸伤害人体和腐蚀仪器。 关键词 ：胆固醇 ；试剂盒 ；酶法；国标法 中图分类号 ：TS207 ·3 文献标识码：A 文章编号：1007—550X(2002)05—0001—06 中老年人的高血压，动脉硬化 ，冠心病 ，中风等疾病与胆固醇物质有关。所以，一般消费者特别 是 中老年人对食品胆固醇持谨慎的态度 为 了控制胆 同醇的摄人量 ，必须了解食品中胆 固醇的确 切含量 。 目前 ，食品胆 固醇定量分析的主要方法有：比色法，酶法 ，气相色谱法 ，高效液相色谱法等ll_1 。 气相色谱法和高效液相色谱法需要大型贵重仪器，一般实验室难 以推广使用 。我国 1994年制定 的标准方法仍是采用传统的比色法——铁铵矾法 (Feng法) l，此法操作繁琐费时 ，且强酸试剂 (浓 H1s仉 ，冰醋酸 ，85％H，PO)易伤害人体和腐蚀仪器。自1973年 Richmond从]Voeardiasp．中提纯胆 固醇氧化酶 ，并用于测定已皂化的血清总胆固醇 以来 『，酶法技术迅速发展。不久 Anain就寻找到 用三合酶 (胆固醇酯酶 CEH，胆固醇氧化酶 COD，过氧化物酶 POD)直接快速测定血清总胆固醇的 方法 『，在临床上很快就取代了传统的比色法。近十多年来 ，随着我国血清胆固醇试剂盒的开发成 功 ，为我国推广酶法测血清总胆固醇提供了极大方便。我们把临床上的酶法试剂盒用于测定蛋黄 胆固醇含量 ，并将此法与国标法进行 比较 ，供 以评价酶法试剂盒用于食 品胆固醇测定的可行性 ，为 食品分析工作提供参考 。 测定原理 ： 胆 固醇酯 + O 一 胆 固醇 +脂肪酸 胆 固醇 +O 业 ．胆 甾 一4一烯 一3一酮 +HO HO：+4一氨基安替 比林 +酚 J -．醌亚胺色原 +H：O 收稿 日期 ：2002 02—27 作者简舟 ：楹东飞 (1955一)，女 ．栖建韫l州人 ．实验师 ．主要 事食品生化 、檄生物生化等方面fl勺研究 维普资讯 · 2 · 福 建 轻 纺 ·2oo2 · 产生的红色醌亚胺色原 ，在 500nm波长处测得吸光值，通过标准 曲线计算出蛋黄胆固醇含量 。 1． 材料与方法 1．1 材料 新鲜鸡蛋，购于福州程埔市场 。 1．2 试 剂 ¨ 1．2．1 血清总胆固醇试剂盒 I．液态酶 ：上海第一生化药业公司紫兴分厂；1