碳纳米管界面上双酶葡萄糖传感器的研究.pdfVIP

2006年11月 第四届海峡两岸分析化学学术会议论文集 湖北-武汉 碳纳米管界面上双酶葡萄糖传感器的研究 许淑霞忆2，张成孝2，漆红兰2 葡萄糖在生物体内具有极其重要的生理意义。葡萄糖浓度可借助其氧化还原酶反应，用酶传 感器定量分析H202的氧化(工作电位高于600my)来确定，但是在高电位下有许多共存电活性 物质可以被氧化而产生干扰，使传器的选择性变差。为了降低电流型生传感器的操作电位，人们 提出了各种方法，其中研究较多的是制备介体性酶传感器【1】，然而介体酶传感器的灵敏度不高， 稳定性也不好，同样介体的氧化电位也偏高。利用葡萄糖氧化酶(GOD)的直接电子转移测定 葡萄糖浓度，工作电压比较低、干扰也小，但GOD的活性中心FAD深埋在酶分子内部，很难 直接迅速地进行电子交换。另一种方法是用辣根过氧化物酶(HRP)与GOD进行偶合，制成双 酶电极12】。它的操作电位也通常较低(．200～0mY)，在此电位下许多物质不能在电极上氧化或 还原，对测定不干扰，提高了生物传感器的灵敏度和选择性。可利用HRP的间接电子转移，即 GOD与HRP进行偶合，实现葡萄糖的电化学测定。 碳纳米管是1991年13j被发现的具有粒径小、比表面积大、表面反应活性高、催化效率高等 优异性质的一种新型碳结构。根据碳管壁中碳原子层的数目而分为多壁碳纳米管(MWNT)和 单壁碳纳米管(SWNT)两种。碳纳米管修饰电极对许多生物分子具有电催化作用：作为固体促 进剂，可用于实现酶直接电化学。使它在电化学领域有广泛的应用前景。 我们用多壁碳纳米管修饰HRP／GOD，利用HRP的直接电子转移构建一种新的测定葡萄糖的 双酶传感器。目的是降低测定葡萄糖的工作电位，消除抗坏血酸和尿酸的干扰。 化学试剂发生反应。用处理过的MWNT修饰玻碳电极，然后用戊二醛、牛血清蛋白将GOD和 HRP分层固定在MWNT修饰玻碳电极表面。 磷酸盐缓冲溶液(PBS)为介质，采用恒电位考察了该传感器对葡萄糖响应的线性范围，线性范 5 围为0～1mmol／L，检出限为0．4mmol／L。对葡萄糖浓度为5mmol／L的溶液重复测定10次， mmol／L。小的‰值说明酶 其相对标准偏差为2．7％。HRP与H202反应的米氏常数％为0．0077 反应速度很快，对底物亲和力很大。 研究了该传感器的最大消除干扰能力。固定葡萄糖溶液浓度为5mmol／L，当抗坏血酸浓度 低于3mmol／L，尿酸浓度低于2mmol／L时其在电极上不产生干扰。该传感器抗干扰能力很强， 因此该传感器完全可以满足临床测定的要求。该传感器在412的条件下储存20天，对葡萄糖的 响应电流降低小于5％，说明该传感器较为稳定。 该生物传感器用于人体血清中葡萄糖含量的检测，采用标准加入法进行回收实验，回收率在 ‘通讯联系人 202 2006年11月 第四届海峡两岸分析化学学术会议论文集 湖北·武汉 化酶偶联，可测定其它氧化酶底物，扩大测定物种。 参考文献： M．ElectrochimicaActa,1992，37：1987． M，Geni6sEu96ne [1】Marchesiello dePrada M A JM．Biosensors N，Mena and [2】GuzmdmV矗zquez A，Pefia L，ReviejoJ，Pingarr6n 279． Bioelectronics，2003，18：1 S．Nature，1991，354：56． 【3]Iijima The CarbonNanotubcs Mutiple-Wall Modifying