结核分枝杆菌（MTB）异质性耐药研究进展.pdfVIP

2 复旦学报 (医学版) 2013年 1月 ，40(1) 结核 分 枝 杆 菌 (Mycobacteriatuberculosis， MTB。Tolani等 ”用 GenoTypeMTBDRplus检 MTB)主要通过药物结合位点或药物活化基因等特 测发现利福平耐药菌株中rpoB耐药异质性达 34 定基因组区域 的突变获得可稳定遗传 的耐药基 因 (22／64)，异烟肼 耐药菌 中异质性 耐药 更高达 型。例如，利福平耐药性是 由于RNA聚合酶p亚 65．7 (23／35)。此外，二线抗结核药物的耐药菌 基编码基因(rpoB)耐药决定区的点突变引起 ]，异 株中也存在异质性耐药 。Chakravorty等 j用分子 烟肼耐药性主要 由过氧化氢一过氧化物酶编码基 因 信标检测技术发现韩 国19．0 (8／42)的喹诺酮耐 (katG)的突变导致 ]。通过检测这些基因的耐药相 药为异质性耐药 。Zhang等 纠用 PCR扩增克隆并 关突变 ，可以预测 MTB的耐药情况。在检测临床 测序 DNA旋转酶 亚基 (gyrA)基因耐药决定区发 分离培养的样本时，经常会发现敏感菌株和耐药菌 现23 (54／235)的喹诺酮耐药菌株为异质性耐药 。 株共存 的现象 ，即异质性耐药_l5]。异质性耐药因为 Streicher等 对氧氟沙星和阿米卡星耐药耐药基 影响药敏结果 以及治疗方案的正确判断和评估而逐 因作直接测序 ，发现异质性耐药在两种耐药菌 中的 渐受到人们的重视。本文将对 目前结核分枝杆菌异 比例分别为25 和 16．3 。 质性耐药的产生及其对 临床 的影响进行综述 。 异质性耐药的现象促使人们研究耐药 MTB的产 异质性耐药的产生 早在抗结核药应用之初 ， 生和发展过程。MTB耐药突变数据库 (TBDReaMDB) 研究者就发现 MTB存在异质性耐药 的现象。由于 的记录显示与同一种药物耐药相关的突变通常有多种 MTB存在 自发突变 ，即使是对药物敏感的MTB群体 甚至数十种。 ，而在临床检测中只发现其中的一至两 中也含有低频率 (10～～1() )的耐药菌 J，但此时耐 种。由此引出的问题是，这些突变是如何在细菌群体 药菌的频率过低无法检测，没有临床意义。抗结核治 中被筛选出来的?通过对同一患者连续采样，Mariam 疗开始后，MTB群体中的敏感菌被逐渐杀死 ，耐药菌 等u 研究发现，在患者治疗过程中，MTB群体对链霉 的频率逐渐上升 ，当达到临界值即被诊断为耐药结核 素先后产生了4种不同的耐药相关突变 (编码3()s核 病。由此可见 ，异质性耐药反映了MTB群体从部分 糖体蛋白的基因r儿 的K87R和K42R突变，16S核 耐药向全部耐药转变的中间过程 ，耐药性的定义也取 糖体RNArrsA513C和 A14o()G突变)，但在治疗后期 决于耐药菌在样本 中被检测到的频率。由于药敏测 只有突变rpsLK42R在群体中被固定下来。本课题组 试方法 的不 同，其检测灵敏度也各不相 同。Canetti Sun等[在近期的研究中用高通量测序技术更细致地 等 于 1969年总结了当时3种主流 的药敏测试方法 研究了3例结核患者体内MTB异质性耐药的发展过 (绝对浓度法、耐药一比率法和比例法)的灵敏度 、特异 程。研究发现在异烟肼耐药性产生的早期，同一细菌 性和操作难易度等特点，建议以比例法作为 MTB药 群体中存在 4～5种与异烟肼耐药相关的突变 (katG 敏测试的标准。WHO的结核病指南采纳 了这一建 V1A，D94N和 S315R突变，”／2A的 (2-15T)，这些突变 议，规定当耐药菌 的频率高于