超声萃取GCMS分析海洋原甲藻、中肋骨条藻中的化学成分.pdfVIP

第十七届全国色谱学术报告会及仪器展览会会议论文集 P．A007 超声萃取一GC／MS分析海洋原甲藻、中肋骨条藻中的化学成分 肖荣辉，马继平”，李捷，吕丽莉，梁彦娟 (青岛理工大学环境与市政工程学院，青岛，266033) 藻门。硅藻是分布最Jl|泛之一的微藻，在全球范围内被认为构成20％左右的初级生产力¨1，是开发 价格低廉、来源丰富、易于分离纯化的多不饱和脂肪酸(PUFAs)，特别是以二十碳五烯酸(EPA)和二十 二碳六烯酸(DHA)的重要米源之一。硅藻是桡足类的主要饵料，原甲藻是桡足类的部分食物来源， 硅藻及原甲藻中化学物质的组成及含量直接影响到桡足类的生长及繁殖，进一部影响到海洋生态环 境。因此，对于海洋硅藻及原甲藻中化学成分的分析鉴定具有重要的意义。目前对海洋藻类中化学 物质的分析集中在脂肪酸的定量测定[2,31，多采用气相色谱和气相色谱．质谱联用的方法，但是对于 藻类中存在的化学物质结构鉴定的定性分析报道不多卜91，对于中肋骨条藻、海洋原甲藻藻中的有机 物质定性分析目前未见报道。本文对实验室培养的中肋骨条藻和海洋原甲藻采用氯仿／甲醇(V：V 2：1)、正己烷两类极性不同的溶剂作为提取溶剂，超卢萃取，气相色谱／质谱联用(GC／MS)定性分 析了藻中的非极性或弱极性的物质，并用面积归一化法估算了各物质的相对含量。从海洋原甲藻中 共鉴定出了29个化合物，中肋骨条藻中共鉴定了32个化合物。 关键词：海洋原甲藻，中肋骨条藻，化学成分，超声萃取，气相色谱一质谱(GC／MS) 1 实验部分 1．1仪器与试剂 Trace DSQ 达过滤器件厂)；FD．1冷冻干燥机(北京博医康实验仪器有限公司)，DME显微镜(上海徕卡显微 镜系统有限公司)。甲醇、氯仿、正己烷均为色谱纯(购自天津市科密欧化学试剂有限公司)。 1．2实验方法 (1)藻的培养和收集 中肋骨条藻、海洋原甲藻由中国科学院海洋研究所提供。培养基采用F／2配方配制，培养温度为 15℃，光照时间为12 r／min离心脱水后收集，．20℃冷冻保存，．45℃冷冻干燥，4℃冷藏备用。 (2)化学成分的提取 2：1)或正己烷中，超 取干燥中肋骨条藻或海洋原甲藻藻粉100mg，溶于90mL氯仿／甲醇(v．V GC／MS进样分析。 (3)GC／MS分析条件 。 Scientific公司)；程序 色谱条件：DB一5弹性石英毛细管柱(30m×0．25mmlD×0．25pm)，(JW 进样量为1此，不分流进样。 2结果与讨论 按1．2．2的方法分别采用氯仿／甲醇(v：v2：1)及正己烷作为提取溶剂，对海洋原甲藻和中肋骨条 藻中的化学成分分别进行分析，对各自所得到的总离子图中各组分的离子碎片质量谱图(图1．4)， 分别利用计算机谱库进行指认，确定了海洋原甲藻氯仿／甲醇(V-V2：1)提取物14种和正己烷提取 物15种，中肋骨条藻氯仿／甲醇(V：V2：1)提取物18种和正已烷提取物14种，最后根据各自的峰 ”通信联系人，马继平(1972一)，女，副教授，博士。研究方向；样品预处理、色谱技术在环境检测中的应用研 360 第十七届全国色谱学术报告会及仪器展览会会议论文集 面积计算各物质的相对含量。质谱定性分析结果表明，海洋原甲藻中相对含量较大的物质包括：二 十二碳六烯酸甲酯占46．1％，正十六酸15．0％，叶黄烯醇14．1％，10，12十八碳二炔酸甲酯12．2％， 二十碳五烯酸甲酯5．8％(氯仿／甲醇提取物)；二十二碳六烯酸甲酯18．5％，二十碳五烯酸甲酯16．0％， 正二十七烷7．6％(止己烷提取物)。中肋骨条藻中相对含量较大的有以氯仿／甲醇提取的主要成分为： 叶黄烯醇42．7％，硬脂酸甲酯15．5％，十六碳烷酸甲酯占7．6％，十六碳烯酸甲酯6．3％，．十三烷酸甲 酯6．1％(氯仿／甲醇提取物)；叶黄烯醇32．9％，正二十七烷6．6％i正二十一烷5．5％，2-甲基十六碳 烷5．2％，二十四烷5．2％，此外胆固醇的占检出物质的含量很高为10．4％，二十碳五烯酸甲酯的含量 为3．2％(正己烷提取物)。海洋原甲藻和中肋骨条