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实验六微生物菌落的观察实验七微生物的分离纯化与菌种保存 实验目的 学习和掌握细菌、放线菌、酵母菌和霉菌四大类微生物的菌落特征; 掌握样品中微生物数量的计数方法; 了解超净工作台的工作原理; 掌握转接试管种的基本操作技术。 路邓葡萄球菌Staphylococcus lugdunensis 1.菌落大小:用格尺测量菌落的直径。大菌落(5mm以上)、中等菌落(3~5mm)、小菌落(1~2mm)、露滴状菌落(1mm以下) 2.表面形状:分光滑、皱褶、颗粒状、龟裂状、同心环状等 3.凸起情况:分扩展、扁平、低凸起、凸起、高凸起、台状、草帽状、脐状、乳头状等 4.边缘状况:分整齐、波浪状、裂叶状、齿轮状、锯齿形等5.菌落形状:分圆形、放射状、假根状、不规则状等 6.表面光泽:分闪光、金属光泽、无光泽等 7.菌落质地:分油脂状、膜状、松软(粘稠)、脆硬等。于酒精灯旁以无菌操作打开平皿盖,用接种环挑动菌落,判别菌落质地是否为松软或脆硬等。 8. 菌落颜色:分乳白色、灰白色、柠檬色、橘黄色、金黄色、玫瑰红色、粉红色等。注意观察平皿正反面或菌落边缘与中央部位的颜色不同。 9.透明程度:分透明、半透明、不透明等。 放线菌的菌落特征 霉菌落特征 实验器材 1. 菌落平板 2. 试管斜面:牛肉膏蛋白胨琼脂培养基,高氏1号培养基,PDA培养基。 3. 仪器或其他用具:接种环, 超净工作台,酒精棉球等。 1.土壤中微生物数量的计数 平板菌落数 土壤中微生物的数量(cfu/g)=——————— 稀释度×菌液量 注意事项 1. 计数土壤中微生物的数量时,应当选择多个菌落数适中的平板进行计数后取其平均值。 2. 划线时动作要轻巧,避免划破斜面。 3. 转接试管种的整个操作过程是在火焰周围的无菌操作区域内进行。 思考题 1. 你所做的稀释涂布平板法、平板划线法是否较好地得到了单菌落?如果是,请计算该样品的微生物含量,并将结果填入下表;如果不是,请分析其原因。 表2 未知菌落的形态 * 实验目的 实验内容 实验器材 实验方法 注意事项 实验报告 微生物学实验-4 实验内容 1.观察并记录平板上的菌落特征 2.计数样品中微生物的含量 3. 转接试管种 菌落 1.定义: 在固体培养基上(内)以母细胞为中心的一堆肉眼可见的,有一定形态、构造等特征的子细胞集团。 2.鉴定标志: 大小、形状、色泽、硬度、透明度、表面、边缘。 A.菌落的形状及边缘状况 1.圆形、边缘整齐、表面光滑;2.不规则状; 3.边缘波浪状;4.边缘锯齿状;5.同心圆状; 6.边缘缺刻状、表面呈颗粒状;7.丝状;8.假根状 B.菌落的凸起情况 1.扁平、扩展;2.低凸面,3.高凸面;4.台状; 5.脐状;6.草帽状;7.乳头状;8.褶皱凸面 图4-1 细菌的菌落特征示意图 酵母菌菌落 实验方法 从土壤中分离微生物操作过程 2.超净工作台的使用 电源开关 紫外灯开关 照明灯开关 大风 中风 小风 风力调节 斜面接种时试管的两种拿法 斜面接种无菌操作程序 稀释度 Cfu数/平板 每克样品中的Cfu数 10-5 10-4 10-6 1 1 1 2 2 2 3 3 3 平均 平均 平均 1 2 3 4 5 6 7 8 2 1 水溶性色素 反面 正面 大小 松密 大小 厚薄 透明度 颜色 隆起形状 边缘 表面 判断结果 菌落描述 干 湿 菌落号 2. 将你们组分离到的微生物菌落特征填入表2。 3. 如何确定平板上某单个菌落是否为纯培养?请简述验证方法。
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