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草酸铵结晶紫染液目录配制 /view/3327035.htm结晶紫染色法测定细胞数 /view/3327035.htm结晶紫染色法检测活体细菌的实验研究 /view/3327035.htm摘要 /view/3327035.htm关键词 /view/3327035.htm1 材料与方法 /view/3327035.htm2 结果 /view/3327035.htm3 讨论 展开 /view/3327035.htm配制 /view/3327035.htm结晶紫染色法测定细胞数 /view/3327035.htm结晶紫染色法检测活体细菌的实验研究 /view/3327035.htm摘要 /view/3327035.htm关键词 /view/3327035.htm1 材料与方法 /view/3327035.htm2 结果 /view/3327035.htm3 讨论 展开 　结晶紫染色液(Crystal Violet Staining Solution)是一种组织或细胞染色时常用的可以把细胞核染成深紫色 染色后的的染色液。用于/view/743005.htm革兰氏染色。 　/view/573647.htm结晶紫是一种碱性染料，可以和细胞核中的DNA结合，从而产生/view/32286.htm细胞核染色。 /view/3327035.htm编辑本段配制 　草酸铵结晶紫染液的配制： 溶液A 溶液B 结晶紫 2克 95%酒精 20毫升 草酸铵 0.8克 蒸馏水 80毫升 　1.将A、B溶液混合，用滤纸过滤后即可使用。 　2.结晶紫滴一滴即可，不需多用，以避免污染桌面及手指。 /view/3327035.htm编辑本段结晶紫染色法测定细胞数　1．在96孔细胞培养板各孔中加0.1ml含5×104～10×4 WEHI-164细胞的培养液（含10％小牛血清的RPMI-1640培养液），37℃ 5％ CO2的二氧化碳培养箱中培养2～3小时，让细胞帖壁。 　2．用RPMI-1640培养液10倍递次稀释TNF标准品，根据需要3～5倍递次稀释待检样品，每孔加0.1ml稀释的标准品或待检样品，每个稀释度3个重复孔。对照孔6个，3个阳性对照孔各加0.1ml含4μg TNF的RPMI-1640培养液，3个阴性对照孔各加100μl RPMI-1640培养液。继续培养18～24小时。 　3．甩去培养液，用/view/706.htmPBS小心洗涤一次，每孔加0.1ml 10％甲醇溶液固定细胞30秒钟。 　4．吸去甲醇溶液，每孔加0.1ml结晶紫染液，室温中放置20分钟。 　5．轻轻甩去染色液，用蒸馏水洗涤各孔，将培养板倒置于吸水纸上吸干水分。自然干燥或37℃烘干。此板可以在室温中长期保存。 　6．测定前，每孔加0.1ml 33％醋酸脱色，充分振荡后在570nm处测定光吸收度。用光吸收度（OD）值对样品稀释度作图，比较标准品曲线和待检样品曲线即可得到待测样品中的细胞因子活性 /view/3327035.htm编辑本段结晶紫染色法检测活体细菌的实验研究摘要 目的 探讨活体细菌着色检测的适宜条件。方法 将/view/321509.htm金黄色葡萄球菌、黄色微球菌、大肠埃希菌和/view/1505833.htm铜绿假单胞菌稀释浓度为5×107菌落形成单位/毫升 (Colony forming unit，CFU/ml)。 经不同浓度与作用时间的结晶紫(Crystal Violet , CV)着色细菌洗涤后，保存于甘油磷酸缓冲液。采用平皿倾注法测取细菌的CFU。结果 与对照组相比，2%CV染色时，细菌CFU无显著性差异（P＞0.05），染料大于此浓度染色时，CFU有差异性（P＜0.05）。染色时间在3min内CFU无显著性差异（P＞0.05）。30%甘油磷酸盐缓冲液保存着色活体细菌，在48h内活性无显著性差异（P＞0.05），60h后有差异性（P＜0.05）。结论 实验方法适用于活体细菌显色法的形态学检测。 关键词 结晶紫 活体细菌 染色 　THE EXPERIMENTAL STUDY OF THE LIVING BACTERIA 　BY CRYSTAL VIOLET STAINING 　Lu Dongming，Yang Dawu, Zhong Zhiqun， Li Yanjun 　Qinghai University Medical College 　Abstract Objective To explore an appropriate condition for the examination of the living bacteria staining. Methods The culture of Staphylococcus aureus, Micrococcus