蛇毒神经生长因子对大鼠肝星状细胞增殖、凋亡及肝纤维化相关蛋白质表达的影响.pdfVIP

网络出版时间：圆园员猿 原 源 原 员远 员猿：猿愿摇 网络出版地址：澡贼贼责：辕 辕 憎憎憎援 糟灶噪蚤援 灶藻贼 辕 噪糟皂泽 辕 凿藻贼葬蚤造 辕 猿源援 员园愿远援 砸援 圆园员猿园源员远援 员猿猿愿援 园园苑援 澡贼皂造 ◇ 论摇 摇 著 ◇ 蛇毒神经生长因子对大鼠肝星状细胞增殖、凋亡及肝纤维化 相关蛋白质表达的影响 胡仁统员，张学荣员，徐摇 瑾员，罗小玲圆，林摇 兴员，廖摇 明员 （广西医科大学 员援 医学科学实验中心、圆援 附属肿瘤医院，广西 南宁摇 缘猿园园圆员） 凿燥蚤：员园援 猿怨远怨 辕 躁援 蚤泽泽灶援 员园园员 原 员怨苑愿援 圆园员猿援 园源援 园园苑 文献标志码：粤 文章编号：员园园员 原 员怨苑愿（圆园员猿）园源 原 园源远愿 原 园远 中国图书分类号：砸鄄猿猿圆；砸猿圆圆援 源苑；砸猿圆怨援 圆源；砸猿圆怨援 圆缘； 砸缘苑缘郾 圆园圆郾 圆；砸怨怨远援 猿 摘要：目的摇 探讨眼镜蛇毒神经生长因子（晕郧云）对大鼠肝星 状细胞（匀杂悦鄄栽远）增殖、凋亡以及蛋白质表达差异的影响，进 一步为蛇毒 晕郧云抗肝纤维化提供依据。方法摇 实验分为对 照组（单纯 匀杂悦鄄栽远 培养）和实验组（晕郧云 进行干预）。应用 酝栽栽检测眼镜蛇毒 晕郧云对 匀杂悦鄄栽远 细胞增殖抑制率；流式细 胞技术检测眼镜蛇毒 晕郧云对 匀杂悦鄄栽远 细胞凋亡的影响；双向 电泳技术观察 匀杂悦鄄栽远 细胞蛋白质表达变化；质谱鉴定差异 表达的蛋白。结果摇 酝栽栽 结果显示 晕郧云 对 匀杂悦鄄栽远 细胞增 殖具有明显抑制作用（缘 皂早·蕴 原员 晕郧云时抑制率为 源愿郾 圆豫 依 员郾 怨豫，孕 约 园郾 园员）；流式细胞仪也有同样的发现，晕郧云（缘 皂早· 蕴 原员）干预组的凋亡率 圆员郾 员缘豫 依 猿郾 猿员豫明显高于对照组的 圆郾 苑豫 依 员郾 缘缘豫（孕 约 园郾 园缘）；比较分析空白对照组和 晕郧云 作 用组的 圆鄄阅耘图谱，找到差异蛋白质点 源苑 个，其中与对照组 相比在 晕郧云作用组表达上调 圆圆 个，下调 圆缘 个；质谱鉴定出 怨 个蛋白质，其中 源 个表达上调，缘 个表达下调。结论摇 蛇毒 晕郧云能抑制大鼠肝星状细胞（匀杂悦鄄栽远）的增殖，诱导其凋亡， 并且影响 匀杂悦鄄栽远 细胞蛋白质的表达。 关键词：眼镜蛇毒 晕郧云；肝星状细胞 匀杂悦鄄栽远；肝纤维化；增 殖；凋亡；流式细胞技术；双向电泳技术；质谱技术 收稿日期：圆园员圆 原 员员 原 圆苑，修回日期：圆园员猿 原 园圆 原 园猿 基金项目：国家自然科学基金资助项目（晕燥 愿员员远园园远猿）；广西自然科 学基金资助项目（晕燥 圆园员员郧载晕杂云粤园员愿圆远愿，运云允允圆园员园鄄源猿）； 广西教育厅科研项目（晕燥 圆园员园员圆酝杂园缘愿）；广西中医药管 理局项目（晕燥 郧在运在员园鄄园员猿） 作者简介：胡仁统（员怨愿愿 原），男，硕士生，研究方向：生物化学与分子 生物学，耘鄄皂葬蚤造：澡怎则藻灶贼燥灶早岳 员远猿援 糟燥皂； 张学荣（员怨远源 原），男，硕士，教授，硕士生导师，研究方向： 眼镜蛇毒 晕郧云与肝纤维化，通讯作者，栽藻造：园苑苑员鄄缘猿缘愿缘源怨， 耘鄄皂葬蚤造：扎曾则泽增岳 泽蚤灶葬援 糟燥皂 摇 摇 多年来对肝纤维化的研究越来越深入，但是缺 乏理想的治疗方案。目前针对肝纤维化的药物治疗 主要还是在离体和动物模型实验中显示具有一定的 疗效，其中包括作用于细胞外基质（藻曾贼则葬糟藻造造怎造葬则 皂葬鄄 贼则蚤曾，耘悦酝）和细胞因子的药物［员］、抑制肝星状细胞 （澡藻责葬贼蚤糟 泽贼藻造造葬贼藻 糟藻造造，匀杂悦）的药物如干扰素［圆］及抗 氧化剂［猿］等。但让众多研究者困惑的是几乎所有 的抗肝纤维化药物在离体细胞以及动物模型中具有 一定的效果而在临床上无效或效果比较差，这导致 了这些抗肝纤维化药物很难在临床应用与治疗。因 为肝纤维化的发生发展是一种多途径、多因素参与 的过程，主要病理改变是 耘悦酝的过度合成与异常沉 积。匀杂悦是参与肝纤维化的最重要细胞，匀杂悦 的活 化、增殖被认为是肝纤维化发生的中心环节，而抑制 匀杂悦增殖、诱导其凋亡成为抗肝纤维化的重要策 略［源］。神经生长因子（ 灶藻则增藻 早则燥憎贼澡 枣葬糟贼燥则，晕郧云）作 为神经营养因子的典型代表［缘］，其在神经领域的应 用已被公认。近年来 晕郧云 诱导 匀杂悦 细胞凋亡的发 现为抗肝纤维化药物的研发提供了一个新的靶点。 眼镜蛇毒中富含 晕郧云，而且分离纯化 晕郧云不仅得率 较高，还具有耐碱、耐酸、耐蛋白酶水解及稳定性高 等的特点，广西是眼镜蛇的主要产地，充分开发这一 资源具有重要的研究意义。因此，本实验通过流式 细胞术、双向电泳鄄质谱技术相结合的方法，在细胞 水平探讨 晕郧云对 匀杂悦