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北京希诺谷生物科技有限公司 实验室工作及手术流程 撰写人-陈奔驰 一、实验室工作重心 实验室的所有工作都应围绕手术为中心展开，为更好的把握手术时间，冲出状态成熟且质量良好的卵而服务。所以实验室工作必须把握几个重点：检测实验犬各项指标、耗材的统计和购买、术前准备、实验记录。检测实验犬的各项指标更是工作的重中之重,检测指标包括：实验犬孕酮值、实验犬接受爬跨的时间、实验犬分泌物颜色变淡的时间。 二、实验室工作流程 查看当天或者第二天是否有手术，有手术要按时准备手术相关的器械等。若无手术则提前更换衣服，带手套，准备抽血、涂片的相关材料，准备过程中如发现耗材不足则要登记。 1、若无手术: 1.首先准备涂片的玻片，并用铅笔写上犬的号与涂片日期，并按顺序放于玻片盒，玻片盒内多放几张无标记玻片随时备用；2.然后准备抽血的橡胶管、止血钳、头皮针、采血管、酒精棉球、干棉球，采血管要标明犬号与日期。3.如果近期有犬进行过手术，则应根据伤口恢复情况进行抗生素的注射，注射量一般为一次0.5g，如果伤口有出血过其他情况则应该进行伤口的冲洗，并相应增加抗生素的使用量。4.为了达到更好的记录效果，随身携带手机进行拍照记录，拍照内容包括犬的整体形态，正面照，阴门照片，阴道涂片后的棉签照片，伤口照片。5.到达狗房后为了避免犬叫嚷或不配合采样，可以先喂食喂水，然后再依次进行采样。6.采样结束后及时将采到的血带回实验室进行离心，并送到一楼化验室进行检验，如果无需检验，则应及时放于冰箱储存。7.处理完血样后对狗房进行打扫。8.打扫完狗房后回实验室进行染片，并对角化程度记录。9.实验完成后，进行数据、照片的整理。2、若有手术1.如果手术时间在上午，则尽早对其余犬进行喂食喂水，手术犬前一天的下午开始禁食禁水。2.上午手术则手术前只需要进行采血，其他在手术后进行。 三、手术的术前准备 1、手术室： ①手术包：由于手术包高压消毒所需时间较长，所以先进行手术器械的包裹与消毒。手术包内器械包括：刀柄（11号）1把，剪刀（组织剪或线剪）2把，持针器2把、有齿镊和无齿镊各2把，组织钳2把，止血钳4把以上，创巾钳4把，小镊子4把，小剪刀2把。将器械整齐放入包单以后，把折叠好的创巾（W形折叠，方便打开）放于器械包单上，包好器械包单，最后用大包单包好，放入装有蒸馏水的高压锅灭菌。灭菌温度为121℃，时长15min。灭菌的手术包放于烘箱内烘蒸8h，防止器械生锈。术前放置于手术台旁的托盘内。 ② 室内清洁：手术室内清洁一般使用新洁尔灭消毒液，用手术室专用毛巾浸泡消毒液后依先后顺序将无影灯、麻醉机、桌面、器械托盘、手术台进行擦拭，然后用清水浸泡的毛巾再次擦洗。擦拭要遵守由净到脏，用上到下的原则。等所有的步骤都进行完毕后，用浸泡过新洁尔灭的拖把清洁地面，清洁后开紫外灯进行全面的杀菌。 ③ 耗材摆放：术前需要进行气管插管、术中监护、动物的保定、术部消毒及术中耗材的开取。气管插管需要用到气管插管（犬一般用7.5-8.5号）、喉镜、平镊、干净纱布（不要求无菌）、纱布条（一根用来固定气管插管，一根用来绑住动物的嘴）、开口器（2ml注射器剪去头部烧平即可）、无针头的20ml注射器。术中监护需要用到监护仪、呼吸检测仪、听诊器，气管插管结束后应立即进行监测、便于犬麻醉出现意外时进行抢救。动物保定用纱布条即可，也可使用废弃的输液管进行保定。术部消毒需要用到酒精和碘酒，用酒精棉球对术部进行消毒后，再用碘酒棉球再次消毒，消毒方法为环形或螺旋形，防止术部外围再次污染术部中心。术中需要用到的耗材包括无菌纱布块、手术刀片、冲卵针、10ml注射器、1ml注射器、生理盐水、输液器、留置针、酒精灯、打火机、手术缝合线。提前放置于桌子的铁盘里。 ④ 手术台：手术台铺好加热垫，加热垫用手术衣包裹（不要求无菌）。 2、准备室（实验室）： ①术前动物准备：术前需要对动物进行术前检测、备皮、扎留置针、麻醉的操作。术前检测需要用到听诊器、计时器、手术记录表等。备皮需要用到电推剪，术部过脏时需要对术部进行擦洗。扎留置针需要用到22或26号留置针、皮筋、酒精棉球、胶带、装有2ml生理盐水的2ml注射器。麻醉分为吸入麻醉和注射麻醉两种：吸入麻醉需要根据犬的体重计算注射丙泊酚的用量，然后配合异氟烷进行麻醉。注射麻醉选用犬眠宝和舒泰联合使用。麻醉前需要注射相应的麻前针来辅助麻醉，一般用用到阿托品个、抗生素、止血敏（酚磺乙胺等）、止痛针（痛立定等）。另外，需要抽取相应的麻醉药进行术中辅助麻醉，如丙泊酚、舒泰等。 ②术者及助手：术前术者及助手需要更换刷手衣，佩戴一次性的口罩、帽子、鞋套、手术衣、手术手套，然后进入手术室进行手术。 ③冲卵相关：术前需要准备冲卵的相关设备、试剂等。试剂包括冲卵液PMSG、sof等，需要提前至少