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血涂片制备染色及白细胞形态观察讲述
血涂片制备染色及白细胞形态观察 根据不同的细胞种类及细胞的不同成分,对酸性及碱性染料的结合能力不同,而使各种细胞呈现出各自的特点。 本实验使用吉姆萨染料:由天青(蓝)2号和酸性染料伊红混合配制而成。 掌握血涂片的制备和染色方法及白细胞的正常形态 原理 目的 器材 载玻片、推片、显微镜、微量吸管、移液枪 试剂 姬姆萨染色液、磷酸缓冲液、甲醇 标本 抗凝血 注意:操作中请穿实验服并带一次性手套操作。 血 涂 片制 备 推片(夹角保持30 ° -45°) 载玻片 血液(10微升) 将推片匀速向前,勿停顿。涂片的厚薄取决于速度和角度:快、大(厚)。慢、小(薄) 一张满意的血涂片应厚薄均匀 头 体 尾鲜明 涂片干燥后用铅笔在血涂片的头 部写上姓名和编号 李四 B 1 2 3 血 涂 片 染色 稀释后的姬姆萨染色液覆盖整个血膜染色15min PBS磷酸缓冲液漂洗 (切勿先倒掉染液) 涂片经水洗干燥后即可镜检 李四123 涂片快速干燥后加甲醇固定2-3min 血涂片的观察 1.染色情况(满意、偏酸、偏碱) 2. 细胞分布情况 红细胞:淡红色,无核的圆形细胞,因红细胞为双凹形,故边缘部分染色较深,中心较浅,直径7-8微米 嗜中性:体积略大于红细胞,细胞核被染成紫色分叶状,可分1-5叶。直径10-12微米 嗜酸性:略大于嗜中性白细胞,细胞核染成紫色,通常为2叶,胞质充满嗜酸性大圆颗粒,被染成鲜红色。直径10-15微米。 嗜碱性:体积略小于嗜酸性白细胞,细胞质中有大小不等被染成紫色的颗粒,颗粒数目较嗜酸性白细胞的颗粒少,核1-2叶,染成淡蓝色。 淋巴细胞:可观察到中、小型两种。小淋巴细胞与红细胞大小相似,圆形,核致密,染成深紫色。周围仅一薄层嗜碱性染成淡蓝的细胞质。 单核细胞:体积最大,细胞圆形。胞质染成灰蓝色。核呈肾形或马蹄形,染色略浅于淋巴细胞的核。直径14-20微米 1.你认为本次实验操作中需要注意的问题是什么? 2.试描述一下你所看到的白细胞,包括细胞的形态/大小及染色情况。 其中,你看到的红细胞又是一个什么情形? 分析讨论
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