生物酶的定向进化及其应用酶的定向进化及其应用.pdf

教学参考 卫生职业教育 ?????? ???? ????? 生物酶的定向进化及其应用 曾家豫 ?? ?? 杨国兵 ?? 廖世奇 ?? ? ? ??西北师范大学生命科学学院? 甘肃 兰州 ??????? ??甘肃省高分子材料重点实验室? 甘肃 兰州 ??????? ??甘肃省医学科学研究院? 甘肃 兰州 ??????? 关键词? 生物酶? 定向进化? 应用 生物酶在酶促反应中可以使反应速率加快 ??? 倍。正是由于这 中图分类号? ??? 文献标识码? ? 个显著的特性使它具有很高的应用价值???。但由于生物酶自身 文章编号? ????? ????? ????? ??? ????? ?? 性质所限? 如热稳定性差和适用环境狭窄等? 使其很难应用于 工业生产中。一般工业用酶不但需要其具有长期稳定性和活 生物酶在现代合成工业中具有重要作用? 主要表现在其高 性、专一性? 而且能适用于水及非水相环境? 最重要的是能接受 效的催化性能方面。近 ?? 年来? 在实验室中运用各种基因工具 不同的底物甚至是自然界不存在的合成底物。 模拟自然进化所设计的生物酶多数已应用于工业生产中? 定向 定向进化是在试管中模拟达尔文的进化理论??? ??? 其中涉及 进化成为人们改造生物酶的重要工具之一。近年来的主要进展 构建一个大的突变基因文库和高通量的筛选。突变文库由各种 包括改造获得的具有新型功能的酶和一些新的更加有效的定 随机突变和体外基因重组方法构建??? ??。突变文库一经构建? 就 向进化的方法。在蛋白质工程方面? 定向进化与理性的设计加 要进行筛选。首先筛选出有活性的突变体? 然后进行下一轮的 速了生物催化在制药业、化工业和食品工业中的应用。 条件筛选? 也就是某些抗性筛选。如此循环? 最终筛选出具有新 在对生物酶的定向进化过程中? 关键步骤是突变基因文库 功能的突变体。在整个定向进化过程中? 突变文库的构建和有 的构建和筛选。一般而言? 一个定向进化的成功与否取决于该 意义突变的筛选是整个实验的核心。 实验中所构建突变文库的大小及其所用的筛选方法。因此? 本 ??? 定向进化中突变文库的构建方法 文首