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第二章3节试剂的配制与使用
(3)动脉采血法:血液气体分析 部位:深部动脉如股动脉、桡动脉等。 一、血液标本 (四)、抗凝剂 用血浆作标本时,需在血液:中加入抗凝剂,抗凝剂种类较多,性质及抗凝原理各异,必须根据检测项目,正确选用抗凝剂,否则,会直接影响测定结果。抗凝剂的种类有草酸钾、氟化钠—草酸钾、肝素。 一、血液标本 (五)血液标本的保存 血液标本采集后,必须及时送检,为防止血清与红细胞间的物质交换,应及时分离血清(浆),如不及时分离会导致细胞内钾转移至血清,使血清钾升高。血清中葡萄糖因酵解致血清葡萄糖浓度降低。不能及时检测的标本或需保留以备复查的标本,一般应置4℃~6℃冰箱保存。 二、尿液标本 尿液标本分随机性一次新鲜尿,定时尿及24小时尿。定量分析多用24小时尿。 (一)、24小时尿标本收集 第一天嘱病人将尿排尽弃去,并记录排尿时间,以后每次排出的尿均收集于洁净干燥带盖的容器中,直至收集至第二天同一时间最后一次排尿为止。混匀,测量其总量,此即为24小时尿。 二、尿液标本 (二)、尿液标本的保存 尿液易长细菌,而细菌的生长会致尿液中化学成分发生改变。故24小时尿的收集,均应在收集第一次尿时即加入防腐剂。如10%麝香草酚异丙醇溶液(加量5ml),加有此种防腐剂的尿标本适宜于糖、胆红素、氨基酸、钾、钠、钙的定量测定,不适宜尿蛋白测定;浓盐酸防腐,用量为1ml/100ml尿,加浓盐酸防腐的尿标本,适宜于17—酮类固醇、17—羟类固醇、肾上腺素、儿茶酚胺、钙等测定,但不适宜尿酸测定。 收集的尿液应及时送检,若不能,应将收集的尿液充分混匀,准确量其总量,记录体积,留取一部分置冰箱4~6℃保存。 三、脑脊液标本 脑脊液标本的采集应由医生或专科护士进行。采集部位有腰椎、小脑延髓池等,临床多以腰椎穿刺采集脑脊液。 腰椎穿刺成功后立即测定脑脊液压力,然后留取脑脊液标本于3个无菌试管中,每个试管2~3ml。因最初数滴可能含有少量红细胞,故第1管作细菌学检查,第2管做化学、血清学(免疫学)检验,第3管做理学和细胞学检验。 标本采集后应立即送检,各实验室应立即检验,并于1h内检验完毕。因标本放置过久,可造成细胞破坏、葡萄糖等物质分解、细菌溶解等,影响检验结果。脑脊液标本应尽量避免凝固和混入血液。若混入血液应注明。遇到高蛋白标本,可用EDTA盐抗凝。 三、脑脊液标本 本章节要点 一、离心机 (1)、差速离心法:根据颗粒大小和密度的不同存在的沉降速度差别,分级增加离心力,从试样中依次分离出不同组分的方法。 该方法操作简便,适用于分离大小和密度相差较大的颗粒,对密度相差较小的颗粒分离效果不理想。 一、离心机 一、离心机 (2)、速率区带离心法:根据分离的粒子在梯度液中沉降速度的不同,使具有不同沉降速度的粒子处于不同的密度梯度层内分成一系列区带,达到彼此分离的目的。 把样品铺放在一个密度变化范围较小、梯度斜率变化比较平缓的密度梯度顶部,在离心力场作用下样品中的颗粒按照各自的沉降速度移动到梯度中不同位置而形成区带,使不同沉降速度的颗粒得以分离。由于该方法是根据颗粒的沉降速度进行分离,所以梯度的密度应低于被分离颗粒的最小密度。 一、离心机 一、离心机 (3)、等密度区带离心法:当不同颗粒存在浮力密度差时,在离心力场下,颗粒或向下沉降,或向上浮起,一直沿梯度移动到它们密度恰好相等的位置上(即等密度点)形成区带,称为等密度区带离心法。等密度区带离心的有效分离取决于颗粒的浮力密度差,密度差越大,分离效果越好,与颗粒的大小和形状无关,但后两者决定着达到平衡的速率、时间和区带的宽度。 一、离心机 一、离心机 2.高速离心技术用的转头 高速和超高速离心技术的转头结构简单,但技术要求极高,因转头在高速旋转时受到很大内应力和拉力,长期使用会造成累积性塑性变形。内部结构细微缺陷,选择喝使用不当会导致转头断裂或爆炸事故。使用转头时,必须根据分离要求,正确选用转头。转头一般用高强度的铝合金(适用于50000rpm)或钛合金(适用于50000 rpm)制成,转头分以下几种:①固定角转头②甩平式转头③连续流动转头④区带转头⑤垂直转头。 一、离心机 4.高速离心机使用中注意事项 高速离心机生产厂家、型号不同,操作方法亦不 尽相同,使用前必须对照实物认真阅读操作说明书,特别应注意以下几点。 (1)两管重量必须平衡等重至0.1g。 (2)更换、取、放转头时,应小心轻放,不能与硬物碰撞,必须反复检查转头的卡口是否对准。严格控制转速在转头转速限制的90%内,不能满速,甚至超速。 (3)高速运转前,离心室内一定要抽成真空,并降至规定温度。 (4)离心过程中增减速度不能过快。 一、离心机 超高速离心机 二、电热恒温水浴箱 二、电热恒温
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