高效毛细管电泳电导法分离检测水中阳离子.docxVIP

高效毛细管电泳/电导法分离检测水中阳离子 摘 要 本实验采用高效毛细管电泳/电导法，以0.1mol·L-1Tris溶液和0.1mol·L-1酒石酸溶液为电泳运行液，运用标准加入法，对中大逸仙泉瓶装矿泉水中的K+、Na+、Ca2+、Mg2+四种离子进行直接分离和检测。最后测得K+、Na+、Ca2+、Mg2+四种离子浓度分别为24.0mg·L-1、6.48 mg·L-1、4.8 mg·L-1和19.6 mg·L-1，其中K+和Mg2+含量相对理论值偏高。 关键词 毛细管电泳 阳离子检测 标准加入法 引言 钾、钙、钠、镁是人体中重要的无机阳离子，其中钾和钠可以调节人体内细胞的渗透压和体液的酸碱平衡，与神经调节有密切关联[1,2]。钙是骨骼发育的基本原料，在人体内调节酶的活性，参与神经、肌肉的活动和神经递质的释放[3]。镁在人体内作为酶的激活剂，促进骨的形成以及具有调节神经肌肉的兴奋性的作用[4]。饮用水中这些离子含量的高低会对人体产生一定的影响，因此，用简单、准确的方法测定这些离子的含量具有十分实际的意义。 目前，定量检测无机阳离子的方法主要有离子色谱法[5]、核磁共振检测法[6]和毛细管电导法。本实验采用毛细管电泳电导法分离检测中大逸仙泉矿泉水中钾钙钠镁四种阳离子的含量，该方法具有灵敏度高、操作简单的特点，且离子之间不存在互相干扰，提高实验效率和准确性。 材料和方法 试剂 0.1 mol?L-1 Tris溶液；0.1 mol?L-1 酒石酸溶液； 1.0×10-4mol·L-1K+、Na+、Ca2+、Mg2+单一标准溶液； 1.0×10-4mol·L-1K+、Na+、Ca2+、Mg2+混合标准溶液； 样品溶液：中大逸仙泉瓶装纯净水（稀释30倍）。 仪器 CES2003毛细管电泳仪、熔融石英毛细管（50cm×50μm）、超声波清洗器、微量移液器、聚乙烯塑料瓶。 实验步骤 准备 （1）将电导检测池的工作点击、辅助电极和高压地电极与电泳平台上的接线端准确联接。依次打开计算机，检测器（电导检测，“输出调节”旋钮处于最小位置左旋到底）和高压电源（“进样/分离”按钮须处于“进样”位置）的电源。检测器预热1-min。双击Windows桌面上的“CES2003”图标，待出现“毛细管电泳数据工作站CES2003”界面后，点击工具栏中的“设置”图标，在弹出的对话框中对参数作如下设置： 速率增益补偿525（省缺值） 点击“确认”，设置完毕，准备进行样品测试工作。 （2）在储液瓶和检测池中各加入约2/3体积的电泳运行液。毛细管柱一次用0.1mol·L-1NaOH溶液、超纯水和运行液各冲洗约2min。毛细管柱的一端插入储液瓶中，另一端插入检测池的不锈钢引导针中并与检测电极保持接触。将高压电源的“分离/进样”按钮按向“分离”位置，这时可观察到显示高压的数码表上显示电压值-15kV（如不是，需用“分离电压”旋钮调节到该电压值），同时显示电泳电流的数码表上显示电流值2.0A左右。点击“毛细管电泳数据工作站”工具栏中的“背景”图标，背景测试完毕后弹出一个结果框显示当前的背景值，按“确认”键后该值自动作为“参数设置”中的“补偿”值，进行背景扣除。点击工具栏中的“启动”图标，这时记录开始，可观察到屏幕上显示出基线。待基线稳定后（一般需要20min），将“分离/进样”按钮按向“进样”位置，准备进样测试。 测量 （1）样品：吸取3.00 mL样品于一个清洁干燥的进样瓶中，静置待用。 （2）进样：取下储液瓶，换成盛有样品的进样瓶，采用电动进样方式，按照设定的进样参数（进样电压9.1 kV，时间为5 s）进样。进样结束后，取下进样瓶，换回储液瓶。 （3）分离：将高压电源的“分离/进样”按钮按向“分离”位置。点击工具栏中的“启动”图标，开始记录电泳谱图。7min后，点击工具栏中的“停止”图标，停止记录。随后将高压电源的“分离/进样”按钮按向“进样”位置，结束电泳测定。点击工具栏中的“峰高”图标，将给出电泳峰的“迁移时间”和“峰高”等数据。点击“保存”图标可将电泳图谱保存在指定的目录下。记录迁移时间。 （4）测量：用标准加入法吸取100μL K+离子标准液于进样瓶中，按（2）和（3）的操作步骤，记录K+的电泳峰高；重复步骤（4），分别重新取样与依次加入其他离子标准溶液记录4种离子的峰高。 结论和讨论 结论 将原水样的毛细管电泳谱图与加入某种离子单一标准溶液后的毛细管电泳谱图进行对比，在4个峰中出现明显增大的峰对应的加入离子的峰。由此可判断从左到右的4个峰对应的离子分别是K+、Na+、Ca2+、Mg2+。 图1 中大逸仙泉水样的HPCE-C4D谱图 图2 添加K+单一标准溶液后的HPCE-C4D谱图 图3