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侵袭性真菌药敏试验操作指南解读 侵袭性真菌病临床实验室诊断操作规范(草案) 本标准由卫生部临床检验标准专业委员会提出 本标准起草单位： 中国医学科学院北京协和医院 北京大学第一医院 复旦大学附属华山医院 本标准起草人: 徐英春 李若瑜 章强强 王瑶 王贺 余进 郭莉娜 张丽 范欣 常见抗真菌药物 多烯类：两性霉素B 唑类：氟康唑、伊曲康唑、伏立康唑、泊沙康唑 氟胞嘧啶：5-氟胞嘧啶 棘白菌素：卡泊芬净、米卡芬净、阿尼芬净 真菌药敏方法 微量肉汤稀释法 改良微量肉汤稀释法 ATB Fungus 真菌药敏试条 Sensititre® YeastOne™比色法真菌药敏板 浓度梯度法 Etest 真菌药敏试条 纸片扩散法 Rosco纸片扩散法 微量肉汤稀释法（BMD） 参考文件 CLSI M27-A3，CLSI M27-S4 原理 将倍比稀释后不同浓度的抗菌药物溶液分别加到灭菌微孔板中，与一定量的真菌在特定的培养时间及培养温度下共同孵育，读取能完全或显著抑制真菌生长的最低药物浓度。 培养基 RPMI 1640培养基 适用菌种 酵母菌及丝状真菌 检测药物 两性霉素B、5-氟胞嘧啶、伊曲康唑、氟康唑、泊沙康唑、伏立康唑、阿尼芬净、卡泊芬净和米卡芬净等 孵育时间 念珠菌属24-48h；新型隐球菌70-74h CLSI M27-A3 CLSI M27-S4 微量肉汤稀释法（BMD） 结果判读 酵母菌 判读标准： 两性霉素B：100%抑制 唑类、5-氟胞嘧啶、棘白菌素类：50%抑制 判定折点 CLSI M27-S4 部分酵母菌种特异折点，其它酵母菌 尚未建立临床折点 CLSI M27-A3 CLSI M27-S4 肉汤稀释法 7 宏量肉汤稀释法（每管含药肉汤含量为1ml，0.1ml药液＋0.9ml菌液） 微量肉汤稀释法（每孔含药肉汤含量为0.2ml，0.1ml药液＋0.1ml菌液） 念珠菌属唑类药物临床折点 药物 CLSI M27-S3 CLSI M27-S4 EUCAST V6.1 氟康唑 S≤8; SDD=16; R≥32 cal, ctr, cpa, clu: S≤2; SDD=4; R≥8 cal, ctr, cpa: S≤2; R4 cgl: SDD≤32, R≥64 6mg/kg/day cgl: S≤0.002, R32 ckr: 天然耐药 ckr: 天然耐药 伊曲康唑 S≤0.125; SDD=0.25-0.5; R≥1 S≤0.125; SDD=0.25-0.5; R≥1 / 伏立康唑 S≤1; SDD=2; R≥4 cal, ctr, cpa: S≤0.125; I=0.25-0.5; R≥1 cal, ctr, cpa: S≤0.125; R0.125 ckr: S≤0.5; R≥2 ckr: IE cgl: IE cgl: IE IE: 数据不足，不足以建立临床折点 8 念珠菌属棘白菌素类临床折点 药物 CLSI M27-S3 CLSI M27-S4 EUCAST V6.1 阿尼芬净 S≤2; NS2 Cal, ckr, ctr: S≤0.25; I=0.5; R≥1 Cal: S≤0.032; R0.032 Cpa, C. guill: S≤2; I=4; R≥8 Cpa: S≤0.002; R4 C. guill: IE Cgl: S≤0.12; I=0.25; R≥0.5 Cgl, ckr, ctr: : S≤0.06; R0.006 卡泊芬净 S≤2; NS2 Cal, ckr, ctr: S≤0.25; I=0.5; R≥1 / Cpa, C. guill: S≤2; I=4; R≥8 Cgl: S≤0.12; I=0.25; R≥0.5 米卡芬净 S≤2; NS2 Cal, ckr, ctr: S≤0.25; I=0.5; R≥1 Cal: S≤0.016; R0.016 Cpa, C. guill: S≤2; I=4; R≥8 Cpa: S≤0.002; I=0.004-2; R2 C. guill: IE Cgl: S≤0.0.06; I=0.125; R≥0.25 Cgl, ckr, ctr: : S≤0.03; R0.003 IE: 数据不足，不足以建立临床折点 9 微量肉汤稀释法（BMD） 结果判读 丝状真菌 判读标准： 两性霉素B：100%抑制 氟康唑、5-氟胞嘧啶：50%抑制 伊曲康唑、泊沙康唑、伏立康唑：100%抑制 棘白菌素类药物：体外药敏试验读MEC值 判定折点 尚未确定丝状真菌的药敏试验临床折点