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新生隐球菌
实验室鉴定方法
上海交通大学医学院
附属瑞金医院
临床微生物科，医院感染控制科
倪语星
一、概述
真菌与细菌的区别
真菌：属真核细胞，有细胞器和细胞核。细胞膜含固醇，细胞壁不含肽聚糖
细菌：是原核生物，无细胞器和细胞核。 细胞膜不含固醇，细胞壁含肽聚糖
真菌细胞基本结构
细胞壁 细胞核
（遗传物质）
细胞质
细胞膜
（固醇）
真菌的分类
? 在组织内以菌丝为主，培养基上产
生类似葡萄球菌的菌落 ? 单细胞真菌，呈圆形或卵圆形
? 以出芽方式繁殖，如：念珠菌 ? 如:隐球菌、毛孢子菌
? 组织胞浆菌
? 菌落形态可产生分枝丝状菌丝体
? 球孢子菌
? 如：曲霉菌、毛霉菌
? 皮炎芽生菌
类酵母样菌
双相样真菌 酵母菌(yeasts)
霉菌(molds)
二、新生隐球菌
实验室鉴定方法
（一）直接镜检
? India Ink
? CSF (~1 ml)
? 直径5-20 μm 酵母细胞
? 荚膜 1-5 μm
? 103-104 cfu/ml
? 敏感性 30-50%
墨汁染色
? 新生隐球菌菌体外有宽厚荚膜，折光性强，用墨汁负染色法
可见圆形透亮菌体外包裹一较宽厚的空白带。而非致病性隐
球菌无荚膜。用病人脑脊液作墨汁负染色检查是诊断隐球菌
脑膜炎最简便、最快速的方法。
形态学特征
圆形或卵圆形，菌体直径2～15μm，革兰染色阳性
? 菌体外有宽厚荚膜，荚膜比菌体大1～3倍，
折光性强，一般不易染色，常用墨汁负染色
法可见圆形的菌体，外绕一较宽阔的空白带
(荚膜)
? 菌体常有出芽，但无真、假菌丝
（二）组织病理学检查
? 胶状（大量致病菌伴有少许炎症）或肉
芽肿性（少量致病菌伴有少许坏死）改
变；
? PAS染色显示酵母细胞的中心区域；
? 粘蛋白卡红或阿申兰染色使荚膜显影；
组织染色
India GMS stain
Ink
PAS stain
各种组织染色
PAS H E Mucicarmine
Immuno-chemistry GMS Alcian blue
（三）分离培养鉴定
分离培养
? 标本接种于沙氏培养基上；
? 病原性隐球菌在25℃和37℃孵育均可生长，而非病原性隐
球菌在37℃不生长。
? 培养2~5d后观察菌落形态特点，并取菌落作墨汁负染色镜
检。
菌落特征
葡萄蛋白胨琼脂培养基：25℃或37 ℃培养
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