豌豆白粉菌ITS基因的快速克隆及序列分析.pdfVIP

? ? — — ??—?——? 江苏农业科学 ????年第??卷第 ?期? 赵 冰 ，刘铁 志，文 静．豌豆 白粉菌 ???基因的快速克 隆及序列分析???．江苏农业科 学，????，?????：??— ??? 豌豆 白粉菌 ???基 因的快速克 隆及序列分析? 赵 冰 ，刘铁 志 ，文 静 ? ?赤峰学院生命科学 系，内蒙古赤峰 ???????? 摘要 ：以白粉菌菌株 ????????为材料 ，通过分子系统分析方法进行 种的鉴定 ，旨在建立 一种快 速有效 克隆 白粉? 菌 内转录间隔区??? ?基因序列的方法 。采用 ??????一???法提取 白粉菌 ????????的基 因组 ???，以此为模板对 ??．? ?? 内的 ???序列进 ???扩增 、克隆及 测序测定 。结 果 ：????????菌株 ???扩增 片段大小 为 ??????，采 用 ???????? ????????软件对序列进行 了分析 ，结合 传统 方法鉴 定确定 其为豌 豆 白粉菌 ???????????????。表 明该 方法具 有经 济 、简? 便 、快速 的特点 ，适合 于 白粉菌的分类鉴定 。? 关键词 ：豌豆 白粉 菌；，? 基 因；克隆 ；??????～???法? 中图分类号 ：????．?? 文献标志码 ：?? 文章 编号 ：????— ????????????— ????— ??? 白粉菌 ?????????????????是专性寄生在植物 表面能产生? ?．? 主 要 试 剂? 白粉状病征 的病原真菌 ，属于子囊菌 亚门核菌纲 白粉 菌 目的? ?????一???购 自美 国伯乐公 司 ；???酶 、质粒 ???小量? 白粉菌科 ?????????????，包括 ??个 属大 概 ???个 种? 。在? 纯化试剂盒 、???片段 纯化试剂盒 和 ?????一?载体购 自大? 麦类 、蔬菜 、果树和观赏植物上 ，常常发生较为严重 的白粉病 ，? 连宝生物技术有限公 司 ；通用引物 ???????一????????????? 目前 已经在至少 ?????属 ?????种被子植物上发现 了白粉病。? ???????一???、???????一???????????????????脱 一???、? 白粉菌的寄主范围非常严格 ，仅寄生在被 子植物上 ，目前在蕨? ???????一??????????????????????一???、???????一? 类植物和裸 子植 物 中还 没有被 发现? 。分子 系统发 育分析? ????????????????????一???由大连宝生物技术有 限公? 表明 ，白粉菌科形成 了一个独特 的单系群? 。传统 的 白粉? 司合成 。? 菌分类主要以形态特征 和生理生化指标 为分类基础 ；但大 部? ?．? 基 因 组 ??? 的提 取 ? 分菌物 的种类 多、分布广 、形态特征复杂 ，而且少数形态特征?