杆状病毒在气升式反应器中感染策略优化.pdfVIP

第 ??卷第 ?期? 武 汉 工 程 大 学 学 报? ???．??? ??．?? ????年 ??月? ?．? ? ????? ????． ????．? ???．? ????? 文章 编 号 ：????— ????????????— ????— ??? 杆状病毒在气升式反应器中感染策略优化? 张佑红，杨 文，危 威，徐智鹏，苏腾甲? ?武 汉工程 大 学化 工与制 药 学院 ，绿 色化 工过程 省部共 建教 育部 重 点 实验 室，湖北 武汉 ???????? 摘 要 ：为了得到杆 状病 毒 感染悬 浮昆 虫细胞 最 佳条 件 ，利 用正 交 实 验探 讨 了气 升 式反 应 器 中感 染 复数? ?????、感染时间 ?????、细胞初 始浓度 ??????及体 系 中的溶氧值 ????的相互作 用关 系以及 对包 涵体 病毒? ????和非包 涵体 病毒????产量的影响．结果表明 ：最佳感 染条 件为 ???为 ?．?，???为细胞处 于对数生长 期? 晚期 ，???为 ?×???????· ??～，??为 ??％ ，最大 ??病毒滴度为 ?．???×?????????· ??～，最大 ??病毒 滴? 度 为 ?．??×??????· ??一．? 关键词 ：杆状病毒 ；昆虫细胞 ；感染策略优化? 中 图 分 类 号 ：????? 文 献 标 识 码 ：?? ???：??．????／?．????．?????????．????．??．???? ?? 引? 言? 结果对实际生产有更大的参考价值·? ?? 实验部分? 利用 昆虫 细胞 一杆 状 病 毒表 达 系统 进 行 重组? 蛋 白、疫 苗 和生 物 杀 虫 剂 的大 规 模 生 产 越 来 越 受? ?．?? 实验 材料? 到 人们 的重 视 ¨?，因 此需 要 对 其 生 产 过程 进 行 优? ?．?．? 培养基? ?????培养基 ??????公司?、? 化 ．近 年来 ，人 们 主 要 在 以 下 几 个 方 面 进 行 了 优? 胎 牛血清 ??????公 司 ?、酵母 提 取 物 及脂 类 复合? 化 ：?．细胞 生长情 况? ；?．培养 基????；?．溶 氧 ；?．? 物 ??????公 司?、??????????一????????公 司 ?．? 反应器 的设 计? ；?．感 染 策 略 ????，其 中包 括 感 染? 培养基组成 ：?????培养基 ，?％?体积分数 ，下同?? 复数 ?????、感 染 时 间 ?????、细 胞 初 始 浓 度? 的胎牛血清 ，?％ 的酵母提取物 ，?．?％ 的脂类复? ?????和培养基的替换．利用高感染复数进行重组? 合物 ，?．?％ 的 ??????????一??．贴壁 培养 、摇瓶悬? 蛋 白和病 毒 杀 虫剂 的 生 产 过 程 已经 很 清 楚 ，在 高? 浮培养 和气 升式 反应 器培养 的培养基 相 同．? 感染 复数 条件 下 ，所 有 细 胞 都 “同步 ”感 染 ??．但? ?．?．?? 细 胞 、病 毒 及 其 计 数? 棉 铃 虫 细 胞? 在 实际 生 产 中 ，采 用 低 感 染 复 数 有 以 下 优 点 ?? ：?