利用L-半胱氨酸脱巯基酶拆分DL-半胱氨酸生产D-胱氨酸.pdfVIP

第 ??卷 第 ?期? 南 开 大 学 学 报?自然科学版?? ???．??? ???? ?????年 ??月? ?????????????????????????????????????????????????????? ???．????? 文 章 编 号 ：????—????????????—????—??? 利 用? 一半胱 氨 酸 脱 巯 基 酶 拆分 ??一半胱 氨 酸 生产 ?一胱 氨 酸? 杜?军? ，?张?奇。，?段静静。，?侯?洁。，? 白?芳。，?白?钢?。? ??．南开大学 生命科学学院 ，天津 ??????；?．中国发酵?业协会 ，北京 ??????；?．南开大学 药学 院，天津 ???????? 摘??? ：利用 ?一半胱氨酸脱巯基酶实现 ??一半胱氨酸 的拆分．将前期构建 的含有恶臭假单胞菌 ??????菌株? 的 ?一半 胱氨酸脱巯基酶基 因的基因工程 菌 ?．??????????????一?????????一??进行诱导表达 ，测定其酶活力为? ???．???／?．以该菌体 为酶 源，考查 ??一半胱氨酸拆分条件 ，确定 其最佳 ?? 为 ?．?，最佳反应温度为 ??℃，最佳? 底 物浓度 ???／?，最佳菌体浓度为 ????／?，最佳反应时间为 ???．在该条件下拆 分 ??一半胱氨酸 ，并将 ?一半胱氨酸? 氧化为 ?一胱氨酸 ，???催化反应体系可获得 ?．??????一胱氨酸 ，收率 为 ??．?％ ，经 ????测定其纯度 为 ??．??．? 为 ?一胱氨酸及 ?一半胱氨酸提供 了一条新 的绿色生产途径 ，具备一定的产业化 前景 ．? 关键词 ：?一半胱氨酸脱 巯基 酶；??一半 胱氨 酸；拆分? 中 图分 类号 ：????? 文 献 标 识 码 ：?? ?? 引? 言? ?一胱氨酸为 ?一半胱氨酸的二聚体 ，通过还原手段可以有效获得重要的药物中间体 ?一半胱氨酸．?一半? 胱 氨酸 是一种 非天 然氨基 酸 ，可广 泛应 用于 医药 、食 品、化妆 品 、饲料等 行业 ．?一半胱 氨 酸可作 为大 肠杆 菌? 的强抑 制剂 ???，对 急性酒 精 中毒 也 具有 缓解 作用 ???．?一半 胱 氨酸 作为 手性 药 物 的重要 中间体口?，可作 为 头? 孢 类抗 生素 的合 成原料??，同时其 各种衍 生物也 可用 于抗 ??? 药 物 ???一???的合成? 等．? ?一半 胱氨酸 的制备 工艺 比较复 杂 ，可采 用不对 称法 直接合 成 ，如喻 明军等 人 ???以 ?一半 胱 氨酸 、?一酒 石? 酸 、丙酮 为底物 通过 不对称 转化 的方法制 备 ?一半胱 氨酸 ，而 目前 ?一半 胱 氨酸 生产大 都采 用化 学拆 分 ??一? 半 胱氨 酸 的方 法 ，如 张涛 等人???采 用 ?一?一?一扁桃 酸拆分 ??一半胱 氨酸 生产 ?一半胱 氨酸．? 酶 具有 旋光 性 ，而 且具 备催化 的专 一性 ，所 以可 以选择 适 当 的酶 作 为外 消旋 体 的拆分 试 剂 ，此 种方 法? 具备反 应条 件温 和 、选 择性 强 、副 反应 少 、收 率高 及光 学纯 度高 等特 点．????年 ，焦 庆才 等人? 以 ?