气相色谱-质谱法测定肝脏组织中盐酸克伦特罗和盐酸莱克多巴胺.pdfVIP

气相色谱 - 质谱法测定肝脏组织中 盐酸克伦特罗和盐酸!克#$ 吴银良 1,2 李晓蔽 1 刘素英 2 沈建忠 ＊ 1 杨 挺 3 1 ( 中国农业大学动物医学院 , 北京 100094 2 ( 农业部畜禽产品质量监督检验测试中卜 , 北京 100026 3 ( 宁波市农产品质量检测中卜 , 宁波 315040 摘 要 建立了同时测定动物肝组织中盐酸克伦特罗和盐酸莱克多巴胺残留量的固相革取 - 气相色谱 - 质谱 分析方法 O 动物肝组织样品在碱化的条件下用乙酸乙酯和异丙醇混合溶剂提取 , 提取液浓缩后用乙酸乙酯溶 解 , 然后再用稀盐酸反革取去除脂肪 , 调 pH 值后经 SCX 固相革取 (SPE 柱净化 , 洗脱液经氮气吹干后经双三 甲基硅基三氟乙酚氨 (BSTFA 衍生 , 采用选择离子模式 ( 盐酸克伦特罗 :86~212~262~277, 盐酸莱克多巴胺 : 163~192~234~250 进行测定 , 外标法定量 O 盐酸克伦特罗和盐酸莱克多巴胺的检出限分别为 0.30 和 1.00 - g/kgO 盐酸克伦特罗添加浓度在 1.0 ~5.0 - g/kg 范围内 , 添加回收率为 77.4% ~88.3%; 相对标准偏差 (RSD 为 3.1% ~5.1%; 盐酸莱克多巴胺添加浓度在 4.0 ~20.0 - g/kg, 添加回收率为 69.8% ~82.1%; 相对 标准偏差 (RSD 为 3.5% ~4.9%; 衍生物的峰面积与被测物浓度分别在 0.003 ~1.00 mg/L 和 0.012 ~ 4.00 mg/L 范围内呈良好的线性关系 , 线性回归系数均大于 0.999O 关键词 动物肝组织 , 固相革取 , 气相色谱 - 质谱法 , 盐酸克伦特罗 , 盐酸莱克多巴胺 , 残留 2005-07-07 收稿 ;2006-03-08 接受 本文系十五攻关项目 重大技术标准研究 资助专项 (NO.2002BA906A75 1 引 言 盐酸克伦特罗 (cIenbuterOI 和盐酸莱克多巴胺 (ractOpamine 是人工合成的 - 肾上腺素能受体兴奋 剂类物质 , 该类物质可以选择性地作用于肾上腺素 , 引起交感神经兴奋 , 广泛应用于治疗支气管炎 O 当 它们高剂量添加在饲料中 , 可导致动物体内的脂肪分解代谢增强 , 蛋白质合成增加 , 显著提高酮体瘦肉 率 1] O 然而由于盐酸克伦特罗易在动物组织 , 特别是肝脏中形成残留 , 当人们食用后 , 就会发生中毒 , 所以我国已禁止作为生长促进剂使用 O 由于近年来我国加大了对盐酸克伦特罗使用的监管力度 , 有些 不法分子转而非法使用盐酸莱克多巴胺 , 严重影响了我国畜禽产品的安全 O 因此 , 对于研究动物肝组织 中同时测定盐酸克伦特罗和盐酸莱克多巴胺残留量具有十分重要的意义 O 针对动物组织和尿液中盐酸克伦特罗的检测方法较多 , 主要有酶联免疫吸附法 ( ELISA 2,3] ~ 气相 色谱法 4 ] ~ 气相色谱 - 质谱法 (GC-MS 5 ~8 ] ~ 高效液相色谱法 (HPLC 9,10] 及高效液相色谱 - 质谱法 11] , 而动物组织中盐酸莱克多巴胺方法相对较少主要有高效液相色谱 - 质谱法 12,13] O 因 GC-MS 法具有灵敏 度高 ~ 假阳性率低的特点 , 常用作筛选后阳性样品的确证 O 本实验针对盐酸克伦特罗和盐酸莱克多巴胺 的化学性质 , 建立了有机溶剂提取 - 旋转浓缩 - 液液分配 - 固相革取相结合的前处理步骤 , 本方法具有灵 敏 ~ 准确 ~ 稳定的特点 O 2 实验部分 2.1 仪器与试剂 6890-5973 气 - 质联用仪 ( 美国 AgiIent 公司 ;EI 源 , 电离电压为 70 eV; 色谱柱 :HP-5MS 毛细管柱 , 30 m X0.25 mmX0.25 - m; 进样口温度 :280C; 源温 :200C; 四极杆温度 :160C; 传输线温度 :280C; 载 气流量 : 高纯 He,0.9 mL/min; 柱温 :70C(0.6 min 、一一一一 25C/min 200C(4 min 、一一一一 15C/min 260C(4 min 、一一一一 15C/min 280C(3 min ; 不分流进样 ; 进样量 1.0 - LO SCX 小柱 : LC-SCX,SupeIcOPark 500 mg, 3 mLO 所用溶剂和试剂均为分析纯或色谱纯 , 盐酸克伦特罗标准品 ( 中国药品生物制品检定所 ; 盐酸莱克多 第 34 卷 2006 年 8 月 分析化学 (FENXIHUAXUE 研究报