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　　胃癌淋巴管的形态计量学研究的论文 【摘要】 目的 研究胃癌淋巴管的形态学特征及其与淋巴结转移的关系。方法 采用d240免疫组化染色检测70例胃癌中心区、癌旁区、正常区内的淋巴管，分析淋巴管的形态学特征与淋巴结转移的关系。结果 胃癌癌旁区淋巴管密度(41.32±15.62)个、总面积(33 139.08±19 352.37)μm2、平均面积(802.12±728.09)μm2、平均周径(132.35±65.76)μm；正常区淋巴管密度(30.06±11.86)个、总面积(45 424.65±33 824.64 )μm2、平均面积(1 511.28±1 301.21)μm2、平均周径(196.19±103.72)μm，差异均有统计学意义（p分别为0.000、0.009、0.000、0.000）。 淋巴结转移组胃癌癌旁区淋巴管密度(43.67±16.42)个、总面积(35 866.71±19 678.53)μm2、总周径(5 851.28±1 897.13)μm、平均面积(1 050.31±765.47)μm2、平均周径(161.90±77.13)μm，无淋巴结转移组胃癌癌旁区的密度(33.38±9.02)个、总面积(23 933.34±15 405.2)μm2、总周径(4 173.56±2 028.18)μm、平均面积(723.76±534.75)μm2、平均周径(123.01±60.88)μm，差异均有统计学意义（p分别为0.019、0.029、0.003、0.000、0.000）；以胃癌癌旁区淋巴管侵犯预测淋巴结转移与病理检查的检出率差异无统计学意义(p=0.125)，且吻合度强（κ=0.822gt;0.7，p=0.000）。.结论 胃癌淋巴管新生存在于癌旁区，新生淋巴管管腔小；胃癌细胞可能是通过破坏癌旁区淋巴管进入淋巴循环而形成淋巴结转移；癌旁区淋巴管侵犯及淋巴管密度与淋巴结转移有关，有望成为预测淋巴结转移及决定手术方式的重要因子。 【关键词】 胃肿瘤 淋巴管 淋巴结转移 淋巴结转移是胃癌最重要的转移方式及独立预后因子，淋巴结状态是决定其期别、预后和治疗方式的关键因子[1]。淋巴管新生与肿瘤淋巴结转移（lymph node metastasis,lm）的关系已经引起很多学者的重视，淋巴管与肿瘤细胞的相互作用是其关键环节。d240是位于胚胎睾丸和睾丸生殖细胞肿瘤中的一种分子量为40kd的糖蛋白，其抗体可以与淋巴管内皮反应，是检测淋巴管的理想抗体[2]。本研究选用淋巴内皮标记物d240行免疫组化染色，用病理图像分析仪对胃癌中心区、癌旁区及远癌区正常胃壁内淋巴管的密度（lymphatic vessel density,lvd)、面积和周径进行定量测定,并分析其与淋巴结转移的关系，探讨胃癌淋巴结转移机制。 1 资料与方法 1.1 研究对象 选取2006年1月～ 2006年10月广西医科大学第一附属医院胃肠腺体外科行胃癌根治术的新鲜胃癌标本70例。其中男54例，女16例；年龄32～ 76岁，中位年龄58岁；病变部位：上部12例，中部26例，下部32例；高中分化6例，低分化64例；病灶≤5cm 32例，gt;5cm 38例；ⅰ、ⅱ期22例，ⅲ、ⅳ期48例；有淋巴结转移54例，无淋巴结转移16例。入选标准：病理证实为腺癌；术前未接受放化疗及免疫治疗；排除伴发免疫性疾病和严重创伤炎症者。 1.2 研究方法 1.2.1 主要试剂及免疫组化染色方法 鼠抗人d240单克隆抗体工作液(mouse antid240,产品目录号zm0465)、鼠抗人细胞角蛋白20单克隆抗体工作液(mouse anticytokeratin 20,zm0075)均购自北京中杉金桥生物技术有限公司。d240染色采用免疫组化染色二步法，抗原热修复(120℃，90s；1mm edta，ph9.5)，dab显色。阳性对照为人扁桃体组织，非免疫血清代替一抗作阴性对照。ck20也采用免疫组化染色二步法，抗原热修复(120℃, 90s;1mm dta, ph8.0)，dab显色。阳性对照为人胃癌组织，非免疫血清代替一抗作阴性对照。 1.2.2 标本取材及处理 胃癌患者手术切除标本,按正常区、癌旁区、中心区（正常区为距肿瘤5cm以上的正常胃壁，且经he染色证实无肿瘤组织、癌旁区为距肿瘤约2mm的区域、中心区为肿瘤靠近边缘的部分）取材，10%中性福尔马林固定, 石蜡包埋, 4μm厚连续切片。 1.2.3 胃癌淋巴管染色的结果判断 光学显微镜下观察, 淋巴管内皮细胞d240 染色阳性为胞浆胞膜呈棕黄色染色，腔内无红细胞。淋巴管密度计数采用r+q 550）计数每一标本4个视野内的淋巴管数, 取其总值作为该标本的lvd，并测量每一淋巴管的面积和周径