胶陀螺中麦角甾醇的结构修饰及抗结核作用的研究的论文.docVIP

　　胶陀螺中麦角甾醇的结构修饰及抗结核作用的研究的论文 作者：魏丹丹，许琼明，孙晓飞 【摘要】 目的研究麦角甾醇及类似物7-脱氢胆甾醇氧化后的抗结核作用。方法从胶陀螺中分离得到麦角甾醇，对其氧化得到麦角甾醇过氧化物;并对麦角甾醇类似物7-脱氢胆甾醇进行氧化得7-脱氢胆甾醇过氧化物;用mtt法检测其氧化产物的抗结核活性。结果麦角甾醇过氧化物及其类似物的过氧化物当浓度分别超过20，50 μg/ml时有抗结核活性。结论麦角甾醇过氧化物及7-脱氢胆甾醇过氧化物具有一定的抗结核活性。 【关键词】 麦角甾醇; 过氧化物; 抗结核 　　abstract：objectiveto study the antituberculous activity of oxidative products of ergosterol and 7-dehydrodesmosterol.methodsergosterol bulgaria inquinants and oxygenized ;its analogue 7-dehydrodesmosterol tt method.results the oxidative products had antituberculous activity l and the 7-dehydrodesmosterol peroxide exceeded 50 μg/ml.conclusionthe oxidative products has invariably antituberculous activity. 　　key armoreus中分出麦角甾醇等一系列甾醇化合物，并证明它们几乎都具有良好的抗结核杆菌和抗eb病毒的活性[8]。 　　本实验从胶陀螺中提取得到麦角甾醇，对其氧化得到麦角甾醇过氧化物，并对麦角甾醇类似物7-脱氢胆甾醇进行氧化得7-脱氢胆甾醇过氧化物;并用mtt法检测氧化产物的抗结核活性。 　 　1 仪器与材料 　　1.1 仪器 旋转蒸发器(re-52a，上海亚荣生化仪器厂);循环水式真空泵(shz-da，巩义市英峪华仪器厂);电热恒温鼓风干燥箱(gzx-gf-9023-bs，上海博泰实验设备有限公司);显微熔点测定仪(xt-5，北京科仪电光仪器厂);超导核磁共振谱仪(unity-inova 300，美国瓦里安公司);质谱仪(tof-ms，英国 micromass公司)。 　　1.2 材料胶陀螺购于延吉市长白山特产品经营部;7-脱氢胆甾醇(纯度97%，sigma公司);柱层析硅胶和薄层层析硅胶g(80-120目)均为青岛海洋化工有限公司产品;显色剂：10%磷钼酸乙醇溶液;化学试剂均为分析纯，由国药集团化学试剂有限公司提供。middlebrook7h9培养基干粉和营养添加剂(oadc)均购自美国bd公司;应用液为含10%oadc 的middlebrook7h9液体培养基;受试菌株：结核分枝杆菌标准株h37rv，来自国家菌种保藏中心;dmso购自国药公司。 　 　2 方法与结果 　　2.1 提取与分离胶陀螺干燥子实体4.60 kg， 70%乙醇溶液回流提取3次，每次3 h，合并提取液，浓缩后得到浸膏1.12 kg。将浸膏用适量的水分散，依次用石油醚、氯仿、醋酸乙酯、正丁醇萃取。石油醚萃取部位经浓缩后得浸膏16.64 g，经硅胶柱层析，用石油醚-醋酸乙酯梯度洗脱，石油醚∶醋酸乙酯(90∶10)洗脱物经重结晶得白色针晶。mp160～162℃，李伯曼反应阳性，tlc的rf值与麦角甾醇对照品完全一致，混合熔点不下降。故确定白色针状结晶为麦角甾醇。 　　2.2 结构修饰 　　2.2.1 麦角甾醇过氧化物的制备麦角甾醇3 g和亚甲基兰0.5 g放于三口瓶中，加二氯甲烷30 ml使其溶解，通入氧气，并开始搅拌，在烧瓶旁放置碘钨灯，室温条件下过夜反应，tlc检测反应完全。反应液和柱层分析硅胶搅拌均匀，干法上样，氯仿-醋酸乙酯梯度洗脱，经减压柱vlc纯化得产品2.5 g。 　　麦角甾醇过氧化物 　　黄色针晶， mp：184～185℃，ir(kbr,cm-1)见图1:3 442.4(oh)、2 958.3、2 872.2、1717.8(c=c)、1 458.3、1 383.7[偕二甲基]、1 042.4、972.7(-o-o-);hrms:c28h46o3 见图2。430.3447,found: 430.3453;1h nmr(400 mhz，cdcl3) 见图3： δppm: 6.51(1h，d,j=8.4hz,h-7)，6.25(1h,d,j=8.4hz,h-6)，5.23(1h,dd,j=15.2、7.6hz,h-22)、5.14(1h,dd,j=15.2 、8.0hz,h-23