不同产地独角莲药材中肉桂酸的含量测定.docVIP

　　不同产地独角莲药材中肉桂酸的含量测定 作者：张洪娟，张妍妍 隋军，徐鹏 【摘要】 　　目的建立独角莲中肉桂酸的高效液相含量测定方法；比较不同产地独角莲中肉桂酸的含量。方法采用高效液相色谱法。色谱柱为迪马-Diamonsil C18（250 mm×4.6 mm，5 μm）；以甲醇∶0.1%磷酸=49∶51为流动相；流速为1ml/min；检测波长为280nm。结果肉桂酸在0.2～1 μg范围内线性关系良好，r=0.999 5，平均回收率为99.58%，RSD为0.95%。结论不同产地独角莲肉桂酸的含量范围为5.247 0～43.677 6 μg/g，差异较大。该方法测定准确，重复性好，可作为独角莲药材的质量控制方法。 【关键词】 独角莲 肉桂酸 高效液相色谱法 　　独角莲为天南星科梨头尖属植物独角莲Typhonium giganteum Engl.的块茎，具有祛风痰、定惊搐、解毒散结止痛的功能。临床应用于 治疗 脑血管病、面神经麻木、颈淋巴结核、慢性支气管炎等［1］，此外还用于美容祛斑方面。近年来有报道独角莲对瘤细胞具有细胞毒作用。本文以肉桂酸为考察指标，采用高效液相色谱法测定独角莲中肉桂酸含量，可有效控制独角莲药材质量。 　　 1 仪器和试药 　　1.1 仪器岛津LC-10AS泵，岛津SPD-10A检测器，岛津UV-160A紫外分光光度仪，昆山KQ-250B型超声仪，Sartorius BP211D型 电子 天平。 　　1.2 药品肉桂酸对照品，购于 中国 药品生物制品检定所；独角莲药材（均为鲜品，切片后 自然 干燥至水分符合规定），购于各产区，经黑龙江省药品检验所初东君主任药师鉴定符合《中国药典》2005版规定标准［2］。 　　1.3 试剂甲醇为色谱纯（迪马公司）；磷酸为色谱纯，天津市科密欧化学试剂开发中心；水为超纯水，其余试剂均为分析纯。 　　 2 方法与结果 　　2.1 色谱条件［3］色谱柱为迪马-Diamonsil C18（250 mm×4.6 mm，5 μm）；流动相为甲醇∶0.1%磷酸=49∶51；流速1 ml/min；检测波长280 nm；柱温为室温。按上述色谱条件，理论塔板数按肉桂酸峰 计算 应不低于2 500。 　　2.2 对照品溶液的配制 精密称取肉桂酸对照品适量，加甲醇溶解并稀释制成浓度为0.03 mg/ml的肉桂酸对照品溶液。 　　2.3 供试品溶液的配制与测定 取独角莲药材粉末（过3号筛）2 g，精密称定，加5%盐酸溶液1 ml搅拌均匀，置具塞锥形瓶中，精密加入三氯甲烷-甲醇（2∶1）溶液20 ml，室温下浸泡30 min，滤过，精密吸取续滤液10 ml，挥干，残渣用甲醇溶解并定容至5 ml，即得供试品溶液。 　　2.4 检测波长的测定取肉桂酸对照品溶液，在200～400 nm波长进行光谱扫描，结果表明，肉桂酸在280 nm处有最大吸收。确立肉桂酸检测波长为280 nm。 　　2.5 供试品提取条件的确定 　　2.5.1 溶剂的选择根据肉桂酸溶解度拟选择甲醇、50%甲醇、三氯甲烷、乙醇、丙酮、乙醚以及三氯甲烷-甲醇不同比例混合溶剂为提取溶剂。实验方法：取独角莲药材粉末（过3号筛）2 g，9份，精密称定，置于具塞锥形瓶中，加5%盐酸溶液1 ml，搅拌均匀。分别加入不同溶剂20 ml，于室温下浸泡30 min，滤过，精密吸取续滤液10 ml，挥干，残渣用甲醇溶解并定容至5 ml，作为供试品溶液。分别注入色谱仪，记录峰面积，计算含量（见表1）。结果显示，以三氯甲烷-甲醇（2∶1）为提取溶剂时，提取率最高，且无杂质干扰，故选择氯仿-甲醇（2∶1）作为提取溶剂。 　　图1 肉桂酸对照品HPLC图（略） 　　图2 独角莲药材HPLC图（略） 　　2.5.2 提取方法筛选取独角莲药材粉末（过3号筛）2 g，3份，精密称定，置于具塞锥形瓶中，加5%盐酸溶液1 ml，搅拌均匀，加入氯仿-甲醇（2∶1）20 ml。分别采取超声处理30 min、室温浸泡30 min和加热回流30 min 3种方法，滤过，精密吸取续滤液10ml，挥干，残渣用甲醇溶解并定容至5 ml，作为供试品溶液。分别注入色谱仪，记录峰面积（见表2）。结果显示，室温浸泡30 min，得肉桂酸含量最高，重复性较好，且方法简单易操作。 　　表1 溶剂的选择结果（略） 　　表2 提取方法筛选结果（略） 　　2.5.3 提取时间的考察取独角莲药材粉末（过3号筛）2 g，5份，精密称定，置于具塞锥形瓶中，加5%盐酸溶液1 ml，搅拌均匀，精密加入三氯甲烷-甲醇（2∶1）溶剂20 ml，室温下分别浸泡10，20，30，45，60 min，滤过，精密吸取续滤液10 ml，挥干，残渣用甲醇溶解并定容至5 ml，作为供试品溶液。分别注入色谱仪，记录