自拟宝宁丸对小鼠免疫功能的影响.docVIP

　　自拟宝宁丸对小鼠免疫功能的影响 作者：李玲，马瑜红，欧阳静萍 【摘要】 　　目的 观察自拟方宝宁丸对小鼠免疫功能的影响。方法测定血清抗体效价，并比较宝宁丸与卡介苗对巨噬细胞功能的影响。结果宝宁丸组血清抗体效价明显提高，并可提高巨噬细胞的吞噬作用。结论宝宁丸对小鼠的体液免疫及细胞免疫功能均有增强作用。 【关键词】 宝宁丸；免疫功能 　　The Influence of Self-mastery Bao-Ning Pill on the Immunity Function in Mice 　　Abstract:ObjectiveTo investigate the influence of self-mastery Bao-Ning Pill on the function of immunity in mice.MethodsSerum antibody titers ined and the effect on macrophage function bet antibody titer of Bao-Ning group proved, at the same time,Bao-Ning Pill could also improve the phagocytosis of macrophage.ConclusionBao-Ning pill has positive effect on both humoral immune function and cellular immunity function of mice. 　　Key munity 　　自拟方宝宁丸由醋制鳖甲、生黄芪、生山药、炒莱菔子、炒白术、防风、炒枳实等14味中药组成。本方由我校中医学教授黄德友、马荣华创制，已在一附院、二附院（原南阳张仲景国医学院附属 医院 ）临床应用十余年。观察240余例，除有效预防小儿感冒外，对积滞、厌食证可健脾和胃，改善其消化功能；对腹痛、腹胀症状可行气导滞、缓急止痛；对鼻炎、扁桃体炎可抗菌消炎，防止反复感染［1］。为了验证宝宁丸的“安内攘外，扶正祛邪”的临床疗效，我们开展了宝宁丸对小鼠免疫功能影响的实验观察。 　　1 材料与方法 　　1.1 药物及制备 　　醋制鳖甲、银柴胡、生黄芪、生山药各10 g，炒莱菔子、防风、炒枳实各4 g，炒白术5 g，炒麦芽、炒神曲、鸡内金各6 g，由我校二附院中药饮片厂制剂教学科研基地按比例制成散剂。实验前浸泡24 h（温度为0～4℃），过滤去渣取上清液，配成浓度为50 g/L的溶液备用。 　　1.2 动物清洁级昆明小鼠，由南阳医学高等专 科学 校实验动物中心提供，小鼠体质量18～22 g，雄性，饲养于清洁级实验室内。 　　1.3 血清抗体效价测定 　　1.3.1 实验分组小鼠32只，按体质量配对后随机分为两组，宝宁丸组（B组）和对照组（C组）各16只，B组以50 g/L的宝宁丸溶液灌胃，2次/d，C组以生理盐水灌胃，2次/d。 　　1.3.2 血清抗体的诱导产生用100 μg·ml-1牛血清白蛋白作为抗原在1,4,8周对小鼠腹腔注射，第1次注射剂量为0.3 ml，第2次注射剂量0.4 ml，第3次注射剂量0.5 ml。 　　1.3.3 取血尾静脉取血，用免疫双向扩散法测小鼠血清抗体效价。在1∶16以上时即达到要求，第9周时集体处死。处死前将小鼠禁食24 h，以免血脂过高。用断头法处死小鼠，每只小鼠分别取血置于1 ml离心管中。常温静置1 h，4℃过夜，使血块收缩，将血块自容器壁分离，将血清全部倾入离心管。4℃下2 500 r/min离心30 min，取上清部分与前面血清混合，3 000 r/min离心5 min取上清液，即为所需血清。 　　1.3.4 血清抗体效价测定准备10支试管，分别加入生理盐水0.5 ml。在第1管内加小鼠血清0.5 ml，混匀后吸出0.5 ml注入第2管，同样混匀后吸出0.5 ml于第3管，依此类推，稀释到第9管，第9管混匀后弃去0.5 ml，第10管不加小鼠血清，只加0.5 ml生理盐水。第1到第9管的稀释倍数分别为2，4，8，16，32，64，128，256，512倍。每管中再加入100 μg·ml-1牛血清白蛋白0.5 ml。混匀后室温放置60 min，以出现明显凝集的试管的稀释倍数为血清抗体效价。 　　1.4 小鼠腹腔巨噬细胞功能测定 　　1.4.1 鸡红细胞悬液的制备［2］于无菌操作下，自鸡翼下静脉采血，置Alsevers溶液中，高压蒸气灭菌，4℃冰箱保存。临用时，用生理盐水洗涤3次，离心弃去上清液，用生理盐水配成20 ml/L(V/V)。 　　1.4.2 实验分组取小鼠30只，按体质量配对后随机分为宝宁丸组(B组)、卡介苗组(K组