藿香正气软胶囊含量测定方法的改进.docVIP

　　藿香正气软胶囊含量测定方法的改进 作者：崔晓丽，郑晓英，许立锋 【关键词】 藿香正气软胶囊;含量测定;高效液相色谱法;方法改进 《 中国 药典》2005年版一部收载的藿香正气软胶囊质量标准是在《卫生部药品标准》新药转正第五册的基础上提升而来，二者比较，现行版增加了苍术和橙皮苷的薄层色谱鉴别，但含量测定方法没有改进。实验发现，用高效液相色谱法测定厚朴含量，部分条件需要改进。药典方法规定：(1)进样量：对照品溶液6μl,供试品溶液10～20μl，不一致，易造成进样误差。(2)和厚朴酚与厚朴酚对照品溶液浓度分别为80μg/ml和100μg/ml，均偏高，应调整至与供试品溶液浓度相近。(3)流动相为甲醇-水(75：25)，欠佳，因其保留时间长，分离效果差，理论板数难达规定要求。笔者对以上三个条件进行改进，用改进后的条件进行实验，取得了良好的实验效果。 　 　1 仪器与试药 　　岛津LC-10ATvp高效液相色谱仪。厚朴酚、和厚朴酚对照品(购自中国药品生物制品检定所)。乙腈为色谱纯，其他试剂为分析纯。藿香正气软胶囊为抽验样品(石家庄神威药业生产)。 　　 2 实验方法与结果 　　2.1 色谱条件 色谱柱：DiamonsilTM(钻石)C18(5μm，200×4.6μm);流动相：乙腈-水-冰醋酸(60：38：2)[1];流速：1.0ml/min;检测波长：294nm;进样量：10μl。 　　2.2 对照品溶液制备 精密称取和厚朴酚、厚朴酚对照品，分别加甲醇制成每1ml各含40μg、50μg的溶液。 　　2.3 供试品溶液的制备 取本品装量差异项下的内容物，混匀，取约0.25g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入稀乙醇50ml，密塞，称定重量，超声提取10min，放冷，称定重量，用稀乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。 色谱图见图1。 　　作者单位：067000 河北承德，承德市药品检验所 a.和厚朴酚对照品 　　b. 厚朴酚对照品c.供试品(藿香正气软胶囊) 　　图1 藿香正气软胶囊HPLC色谱图 　　2.4 线性关系考察(按厚朴酚峰计) 精密吸取不同浓度的厚朴酚对照品溶液，注入高效液相色谱仪，测定峰面积，以峰面积为纵坐标，对照品进样量(μg)为横坐标，绘制标准曲线，结果表明厚朴酚在0.0501 ～ 1.6032μg范围内呈良好的线性关系，回归方程为 Y=1887.216+616437.465X，r = 0.9999 ，见表1。表1 线性关系考察结果 　　2.5 精密度试验(按厚朴酚峰计) 精密吸取同一厚朴酚对照品溶液，连续进样6次，测定峰面积，其RSD为 0.35 %，表明精密度良好，见表2。 　　2.6 重现性试验 取同一批号的样品5份，精密称定，按供试品溶液制备方法制成供试品溶液，照上述色谱条件测定，供试品中厚朴酚与和厚朴酚总含量的RSD为0.26%，表明重现性良好，见表3。表2 精密度试验结果表3 重现性试验结果 　　2.7 加样回收率试验 精密称取已知含量为0.9636%的同一样品约0.13g，共5份，每份均精密加入厚朴酚1.0020mg，和厚朴酚0.8025mg，按供试品溶液制备方法制备，照上述色谱条件测定， 计算 加样回收率，结果见表4。表4 回收率试验结果 　 　3 小结 　　3.1 在基层药检所，用HPLC法测定含量，除少量自动进样外，多采用定量环进样，所以统一对照品和供试品溶液的进样量，一方面消除进样误差，另一方面不必更换定量环，简化操作。同时降低对照品溶液浓度，使之与供试品溶液浓度接近，测定结果更准确。 　　3.2 改进流动相，大大缩短了保留时间，既节约试剂，又减少了试剂的污染和对人体的危害。流动相改变后，经方法学验证证明,方法可行。另外厚朴酚与和厚朴酚为同分异构体，在做线性关系等考察时考察其一即可。 　　3.3 实验对比知，改进后的色谱图分离效果好，理论板数(按厚朴酚峰计)由原来的不足5000(标准规定不低于5600)上升至9000以上。建议在以后的标准提升时可做 参考 。 【参考