超滤法对绿原酸提取率的影响.docVIP

　　超滤法对绿原酸提取率的影响 【摘要】 目的 考察超滤法纯化金银花提取液的最佳条件。 方法 采用超滤法（分子截留值5 000），采用高效液相色谱法测定绿原酸的含量，筛选超滤压力、药液流速、循环时间3个因素的最佳条件。结果 压力控制在0.05～0.07 MPa，循环流速控制在2 d/s左右，循环时间控制在2 h内，最终纯化液干浸膏中绿原酸高达44.10 mg/g.。结论 本法是纯化金银花药材及其制剂的一种快速有效的方法。 【关键词】 超滤法；金银花；绿原酸；纯化条件 　　超滤法是20世纪60年代兴起的一项膜分离新技术。国内已有人将超滤法运用到金银花的提取中，以超滤法与醇沉法相比较,实验结果显示70%醇沉法较超滤法得到的提取物多，但绿原酸得率低，超滤法较水提醇沉法能更有效地保留有效成分［1］。 　　 　　绿原酸分子量为354.3，采用超滤(分子量截留值5 000)可以除去其中的多糖、蛋白质等大分子物质。本实验对高速离心后的水提液进行超滤，用高效液相色谱法测定超滤液中绿原酸含量，以确定超滤程度，避免有效成分的损失。 　　1 仪器与试药 　　中空纤维超滤膜实验室小设备（北京旭邦膜设备有限责任公司）；RB15蠕动泵（天津纺织工学院膜技术工程公司机械厂）；中空纤维超滤柱CLCPack ODS柱（250 mm×4.6 mm）；柱温：25 ℃；流动相：乙腈0.4%磷酸（体积比13∶87）；流速为1 mL/min；检测波长：327 nm。 　　2.1.3 标准曲线的制备 精密吸取对照品溶液(50.10 μg/mL)1,5,10,20,40 μL分别注入液相色谱仪，以绿原酸对照品的量为横坐标(x)，以绿原酸峰面积为纵坐标(y)， 计算 回归方程为：y=158.69x + 2.1483，r=0.99998。结果表明绿原酸在0.0501～2.0040 μg范围内呈良好线性关系。 　　2.1.4 样品测定 精密吸取样品溶液1 mL于10 mL量瓶中，相应溶剂定容，摇匀，采用随行标准法。 　　2.1.5 供试品溶液的制备 提取液经0.45 μm滤膜滤过，即可。 　　2.2 超滤仪的使用 　　2.2.1 初用时的前期处理 　　①将超滤组件内的保护液放掉，储液箱内加入清洗水，水压不超过0.15 MPa，进水通过超滤组件经浓缩液口和超滤液口排出，不得小于10 min。 　　②采用质量分数0.2%～0.5%的氢氧化钠溶液循环清洗30 min。清洗时浓缩液口排液量应稍大于超滤液口的排液量。 　　③蒸馏水清洗超滤组件，至少40 min。 　　2.2.2 运行 样品（经高速离心后）从料液槽中经蠕动泵输入中空纤维超滤柱，其中的大分子杂质从浓缩液出口回到原样品料液槽中，而小分子药液则在压力驱动下透过超滤膜，从中空纤维外腔的透过液出口流出。如此反复循环，直到达到分离和浓缩要求。超滤过程中，压力通过调压阀和蠕动泵的转速来控制，流量通过蠕动泵的转速调节钮控制。超滤完毕，用蒸馏水等压冲洗（关闭超滤液出口）数次，至达到要求。 　　2.2.3 清洗 每次运行完毕后，应对整个超滤系统进行清洗：用质量分数为0.2%～0.5%的NaOH溶液,浸泡2 h，循环清洗1 h;质量分数为0.2%～0.5%的HCl溶液，浸泡2 h，循环清洗1 h;用纯水清洗至排出液pH值为6～7。 　　洗涤过程中可正、反向交替洗涤，如果污染较严重则用质量分数为0.1%的过氧化氢进行清洗。 　　2.3 超滤条件的确定 　　 　　在超滤设备已经确定的情况下，可调整的操作条件主要有操作压力、温度、时间、循环流速等［2］。 　　2.3.1 操作压力的确定 当操作压力较低时，膜阻可近似为常数，此时膜通量与膜两侧的压力差成正比，压力过低，通量过低，纯化效率低。随着操作压力的增加，膜通量增加，纯化效率提高。但当操作压力过高时，由于膜的结构比较疏松，这样会使膜产生压实或增厚，其通道变窄，膜阻增大，使溶质对流迁移到膜表面的速度增大，从而部分地或完全地抵消了错流流动的剪切力所产生的在膜表面沉淀的溶质的迁移，膜通量下降。 　　通过实验得出操作压力对流速 影响 的曲线见图1。从图1可见，当操作压力在0.05～0.07 MPa时，浓缩液的流速是最快的。 　　图1 操作压力对流速的影响（略） 　　Fig.1 The effect of operation pressure to floination of floination of circle time 　　3 结果与讨论 　　3.1 本实验选用分子量截留值为5 000的超滤膜，最终工艺定为超滤设备压力控制在0.05～0.07 MPa，循环流速控制在2 d/s左右，将原药材100 g，水煎煮后合并提取液，高速离心后，进行超