病毒的蛋白分子子.PDFVIP

·342 · doi 10.3969/j.issn. 1673-4254.2013.03.07 J South Med Univ, 2013, 33(3): 342-345 基础研究 从白纹伊蚊与致倦库蚊分离和鉴定可结合登革从白纹伊蚊与致倦库蚊分离和鉴定可结合登革ⅡⅡ病毒的蛋白分病毒的蛋白分子子 付宇姣，郑学礼，潘 京 南方医科大学公共卫生与热带医学学院病原生物学系，广东 广州 510515 摘要：目的筛选登革Ⅱ病毒（DENV-2）识别白纹伊蚊、致倦库蚊的连接分子。方法 提取不同发育时期白纹伊蚊、致倦库蚊的总 蛋白，用SDS-12% PAGE 进行分析，用病毒覆盖蛋白结合试验（VOPBA）筛选不同发育时期白纹伊蚊、致倦库蚊表达连接 DENV-2 分子。结果 VOPBA 检测不同发育时期白纹伊蚊显示：幼虫样品的泳道可见到25 000、35 000、50 000 的DEN-2 结合分 子，蛹样品的泳道可见到35 000、50 000 分子，雄蚊样品可见到50 000 分子，雌蚊样品中可见到35 000、50 000 分子。DEN-2 结 合蚊35 000 分子在白纹伊蚊幼虫、蛹及成蚊的雌蚊的三个阶段均存在，而雄蚊的成蚊则缺少这一分子。VOPBA 检测不同发育 时期致倦库蚊：幼虫样品可见100 000 分子，蛹样品可见40、100 000 分子，另外在50 000 位置上下亦可见48 000、60 000 左右的 多个条带，雄蚊与雌蚊样品均见40 000、100 000分子。结论 35 000 大小的蛋白分子分布与白纹伊蚊感染组织向性相关。 关键词：白纹伊蚊；致倦库蚊；登革Ⅱ病毒；受体分子 Identification of dengue II virus-binding proteins from Aedes albopictus and Culex. Quinguefasciatus FU Yujiao, ZHENG Xueli, PAN Jing Department of Pathogenic Biology, Collage of Public Health and Tropical Medicine, Southern Medical University, Guangzhou 510515, China Abstract: Objective To screen DENV-2 binding proteins from Aedes albopictus and Culex. quinquefasciatus. Methods The total proteins of Aedes albopictus and Culex. quinquefasciatus in different developmental stages were prepared and analyzed with SDS-12% polyacrylamide gel. After electophoresis the proteins were transferred using Mini Trans-Blot Electrophoretic Transfer Cell (Bio-Rad ) to a nitrocellulose membrane. Virus overlay protein-binding assay (VOPBA) was carried out using anti-dengue virus 1-4 monoclonal antibody. Results In Aedes albopictus, VOPBA detected DEN-2 binding molecules of 25 000, 35 000, and 50 000 in larvae samples, molecules of 35 000 and 50 000 in pupae samples, a 50 000 molecule in male mosquito samples, and molecules of 35 000 and 50 000 in female mosquito samples. DENV-2 binding protein of 35 000 was found i