蔗糖与接种量组合对长春花培养细胞吲哚生物碱合成的影响.docVIP

Bioprocess 生物过程, 2012, 2, 75-80 /10.12677/bp.2012.22013 Published Online June 2012 (/journal/bp) Effect of Sucrose and Inoculating Quantity Combination on the Indole Alkaloids Synthesis of Catharanthus roseus Culture Cell Nan Zhao, Wen Chen, Zhigang Guo * Department of Chemical Engineering, Tsinghua University, Beijing * Email: guozhig@ Received: Mar. 21st, 2012; revised: Apr. 14th, 2012; accepted: Apr. 28th, 2012 Abstract: The experimental results show that, the initial pH of 6.5 is the optimum condition to the accumulation of cell biomass and the synthesis of indole alkaloids. When inoculation rate is at 20%, the content of indole alkaloids increase with the sucrose concentration increased, add 90 g/L sucrose, the content of vinblastine reached 1.7 mg/g dry cell. When the inoculation rate increased to 25% or 30%, a lower concentration of sucrose is conducive to the synthesis of indole alkaloids. 60 g/L sucrose and 25% of the inoculation rate combination is conducive to the cell biomass accumu- lation. Keywords: Catharanthus roseus; Cell Culture; Vinblastine; Terpene Indole Alkanoid 蔗糖与接种量组合对长春花培养细胞吲哚生物碱合成的影响 赵 楠，陈 文，郭志刚* 清华大学化学工程系，北京 Email: guozhig@ * 收稿日期：2012年 3月 21日；修回日期：2012年 4月 14日；录用日期：2012年 4月 28日 摘 要：实验结果表明，初始 pH为 6.5时有利于细胞生物量积累和吲哚生物碱的合成。接种量在 20%时，随着 蔗糖浓度的提高吲哚生物碱的含量也提高，添加 90 g/L蔗糖时，长春碱的含量达到了 1.7 mg/g干细胞。当接种 量提高到 25%或 30%时，较低浓度的蔗糖有利于吲哚生物碱的合成。60 g/L蔗糖与 25%接重量组合有利于细胞 生物量的积累。 关键词：长春花；细胞培养；长春碱；萜类吲哚生物碱 1.引言 长春新碱的稳定生产。近 30 年来，研究者在长春花 [2-4] 高产细胞系的筛选 ，不同植物器官的培养与培养条 长春花植物体中的长春碱和长春新碱的含量仅 [5-7] 件优化 ，通过诱变剂诱导和筛选抗性细胞株培养 [1] 有百万分之几或十万分之几 ，但是，由于长春碱或 [8-11]，通过液液两段培养，在产物合成阶段通过添加 长春新碱的特殊抗癌疗效，人们不得不花费巨额成本 从长春花植物体分离长春碱或长春新碱。为了降低长 春碱的生产成本，科学家想通过长春花细胞培养，提 高细胞中的长春碱或长春新碱含量，以实现长春碱或 代谢前体和诱导子等[12-17] 各个方面进行了大量研究。 也确实大幅度提高了蛇根碱、阿玛碱或长春质碱的含 量。但是绝大多数研究不能从培养细胞中获得长春碱 或长春新碱。Parr 等从转化的发根中检测到了长春碱 的存在，但在离体培养的根中却检测不到长春碱。 [7] * 通讯作者。 Copyright ? 2012 Hanspub 75  蔗糖与接种量组合对长春花培养细胞吲哚生物碱合成的影响 [18] Miura和 Okazaki在长春花细胞培养中得到了微量 2.3. 细胞接种量和蔗糖添加量的均匀实验