乙型肝炎病毒相关性肝癌患者的比较蛋白质组学研究.pdfVIP

Vol. 30 No.9 高等学校化学学报 1763 -1766 2仰年9 月 CHEMICAL JOURNAL OF CHINESE UNIVERS汀IES 乙型肝炎病毒相关性肝癌患者的 比较蛋白质组学研究 刘池波1 ，梁 勇1 气潘春琴1 ，王海宝1 ，牟思华1 (1.台州学院医学院附属台州市立医院，台州 318仪)(); 2. 台州学院医学院，台州 318仅)()) 摘要 筛选并鉴定了乙型肝炎病毒(HBV) 相关性肝癌的血清差异表达蛋白.采用蛋白芯片及表面增强激光 解吸电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术对正常人与乙型肝炎病毒相关性肝癌患者术前血清分别进行检 测，共发现了 44 个差异蛋白，其中 21 个上调， 23 个下调.通过高效液相色谱技术分离纯化其中表达差异最 明显的蛋白，并进行质谱鉴定.通过蛋白功能结果分析表明，这些蛋白的差异表达可能与乙型肝炎病毒相关 性肝癌的发生机制密切相关. 关键词 乙型肝炎病毒相关性肝癌z 表面增强激光解吸电离;蛋白质组 中图分类号侃98. 2; R735. 7 文献标识码 A 文章编号但51 -0790(2α)9)回-1763-04 乙型病毒性肝炎(Hepatitis B virus , HBV) 是导致肝癌的最大的危险因素之一.目前肝癌的临床诊 断主要依赖于影像学证据、血清学指标及肝脏穿刺组织的病理组织学和细胞学检查.其中影像学方法 无法准确判断占位的良、恶性，而肝脏穿刺病理学检查是有创检查，存在并发症，所以临床主要依赖 于血清学指标，主要包括甲胎蛋白(α-Fetoprotein ， AFP) 、 α-L-岩藻糖昔酶等早期诊断肝癌[1 斗]但其 诊断特异性和敏感度不是很强，所以有必要寻找新的肝癌血清学诊断标志物. 由于蛋白质是细胞生理活动和代谢调控的主要执行者，所以细胞在向癌分化的过程中，蛋白质的 变化是最直观的体现者.对癌症血清标本中特异性蛋白标志物的发现和鉴定[MI ，一方面有利于肝癌 的早期发现，对癌变类型进行分型;另一方面，在化学基因组学研究中，蛋白质组学及其相关技术可 以用来发现药物靶点[6.7] ，这对目前进行的抗癌药物的筛选和研制，特别是天然小分子产物及中药有 效组分的药物靶点筛选提供了技术支撑.采用激光解吸电离飞行时间质谱技术(SELDI-TOF-MS) [8-10] 对乙型肝炎病毒相关性肝癌患者进行蛋白质指纹图谱研究，筛选差异蛋白，并利用高效液相色谱技 术[11] 结合基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)υ2] 对差异蛋白进行鉴定，并初步探 讨差异蛋白与乙型肝炎病毒相关性肝癌的关系. 1 实验方法 1.1 试剂、仪器及样晶来源 尿素、 α·氨基4-起基肉桂酸、二[(3-胆酷胶丙基)-二乙胶]-丙磺酸( CHAPS) 、乙腊、三氟乙酸 (TFA) 和白芥子酸(SPA) 等均购自 Sigma 公司. CMlO型弱阳离子交换芯片，购于美国 BIO-RAD 公司， PBS-HC 型蛋白芯片阅读机购自美国 Ciphergen 公司， BIFLEX 皿型基质辅助激光解吸/电离飞行时间 质谱购自德国 Bruker Daltonics 公司. 乙型肝炎病毒相关性肝癌血清标本取自 2∞7 年 1 月四2∞8 年5 月期间台州学院医学院附属台州 3 市立医院感染科住院患者.经检查证实，临床HBeAg( +)或 HBV-DNA 定量大于10 copies/mL ， 3 个月 内均未输血;排除合并丙型肝炎、丁型肝炎及可能合并血吸虫肝病和(或)酒精性肝病.采集未经手 收稿日朔:双阴{)1-17. 基金项