消抗灵Ⅱ号对解脲支原体体外抑菌的实验研究.docVIP

　　消抗灵Ⅱ号对解脲支原体体外抑菌的实验研究 【摘要】 　　目的 消抗灵II号对解脲支原体感染的实验研究包含两部分，一部分为本实验所负责的内容，即：消抗灵II号对解脲支原体体外抑制的实验研究，旨在证明其对Uu的抑制作用；一部分为消抗灵II号对Uu的体内抑制实验，旨在证明其对机体免疫系统的作用。本试验的研究目的是探讨消抗灵II号 治疗 Uu感染的作用机制，证明其与常用的抗生素阿奇霉素相比所存在的优势；优化方中的药物组成，为消抗灵II号广泛应用于临床及进一步的研究奠定基础。方法采用药基法，以培养液倍比稀释中药药液及抗生素药液，使其共含有10个稀释度，并设立阳性对照组、阴性对照组及药液培养基对照组。经培养24～48h后，待阳性对照组发生颜色改变时观察结果。比较消抗灵II号全方、方中各药物及阿奇霉素的抑菌效果，优化方药组成。结果①消抗灵II号组成药物的抑菌效果依次如下：鱼腥草（MIC50:7.81 g/L， MIC90:62.5 g/L，敏感率：80.00%）、垂盆草（MIC50: 7.81 g/L， MIC90: 62.5 g/L ,敏感率：70.00%）、黄柏（MIC50: 7.81 g/L，MIC90: 62.5 g/L ，敏感率：53.33 %）、连翘（MIC50: 7.81 g/L，MIC90: 125.00 g/L ，敏感率：53.33 %）、黄芪（MIC50: 31.25 g/L，MIC90: 250.00 g/L，敏感率：23.33 %）、甘草（MIC50: 31.25 g/L，MIC90: 250.00 g/L，敏感率：16.67 %）、土茯苓（MIC50: 31.25 g/L，MIC90: 125.00 g/L，敏感率：10.00 %）、党参（MIC50: 62.5 g/L，MIC90: 250.00 g/L，敏感率：0）。② 全方、阿奇霉素对Uu抑菌效果如下：全方：MIC50：7.81 g/L，MIC90：62.5 g/L，敏感率：73.33%，耐药菌株数：0；；阿奇霉素:MIC50：0.078 g/L，MIC90：1.25 g/L，敏感率：53.33%，耐药菌株数:8（26.67%）。③精简后药方:MIC50：7.81 g/L，MIC90：31.25 g/L，敏感率：83.33%，耐药菌株数:0。结论①消抗灵II号在体外对Uu有明显的抑制作用。精简药物组成后，最小抑菌浓度没有明显的改变，但对Uu的敏感率增强。②阿奇霉素在体外对Uu有明显的抑制作用，但耐药菌株较多，提示：用中医药治疗Uu感染可能成为代替、或协助抗生素治疗的方法。 【关键词】 消抗灵Ⅱ号 解脲支原体 抑菌实验 　　近年研究发现，解脲支原体（Uu）感染与成人泌尿生殖道系统疾病密切相关，可引起非淋菌性尿道炎、慢性前列腺炎、不孕不育、妊娠期感染等疾病。消抗灵Ⅱ号是导师韩延华教授治疗Uu感染的经验方。临床治疗总有效率达76.19%。方中以垂盆草、连翘、土茯苓、黄柏、鱼腥草清热解毒，对抗Uu；以黄芪、党参、杜仲等药物固护正气，增强机体的免疫力。 　　 1 方法 　　分别将5种中药、5药合剂、阿奇霉素胶囊制成药液。连续倍比稀释，对7株解脲支原体标准菌株（Ⅰ型、Ⅲ型、Ⅳ型、Ⅷ型）进行体外抑菌实验。实验具体方法如下：①将备用新鲜培养液基置于37℃电热保温箱中，预温1 h；②在12×8孔的聚苯乙烯微量板上，将50 μg 备用煎剂加入第2，3孔；③将50 μg新鲜培养液基分别加入第3至11孔；④用微量加样器，从第3孔开始倍比稀释备用煎剂至第11孔；⑤第1孔加液基150 μg，第2至11孔各加100 μg ，第12孔加200 μg；⑥第1至11孔各加Uu液体培养物50 μg；⑦第l孔为阳性对照，第12孔为阴性对照。药物浓度从第2孔始依次为：100．00，50．00，25.00，12.50，6.25，3.125，1.56，0.78，0.39，0．19 mg/L ，共10个稀释度；⑧ 每一孔均滴石蜡油，以可以覆盖液面为标准。电热保温箱内，37孵育24 h后观察结果，直至阳性对照孔发生颜色改变，以最低无颜色变化孔的药物浓度定为MIC。所有实验均建立复孔，相差两个浓度及以上者视为失败，重新测定，相差一个浓度者取较小浓度。根据结果将敏感性较高的中药重新组合，重复实验过程。 　　 2 结果 　　5味中药体外抑菌实验结果：鱼腥草：MIC50=1.9625 g/L，MIC90=3.125 g/L，敏感率：85.71%；垂盆草：MIC50=1.9625 g/L，MIC90=3.125 g/L，敏感率：71.43%；黄柏：MIC50=3.125 g/L，MIC90=25 g/L敏感率：71.43%；连翘：MIC50=6.25 g/L，MIC90=12.5 g/L，敏感