聚乙烯醇降解酶发酵过程模拟.pdfVIP

第 27卷笫 2期 化学反应T程与T艺 、bl27．NO2 20I1年4月 ChemicalReactionEngineeringandTechnology Apr．201l 文章编号：l0OI—763l(2011)02—0lO9—05 聚乙烯醇降解酶发酵过程模拟 王能强 ，黎小军2，欧长军 ’，梁 芳 。，王 栋 (1．湖南科技大学生命科学学院，湖南 湘潭 4I1201；2．新余学院数学与信息科学系，江西 新余 338004) 摘要：应用 Matlab软件对聚乙烯酣降解酶发酵过程数学模型进行最优参数f+计和非线性曲线拟合，得到了假单胞 葡PseudomonasspXTIl-Z90S发酵生产聚乙烯醇 (PVA)降解酶的荫体牛长、底物 PVA消耗和聚乙烯醇降解酶合 成的数学模型。绌果表叫。模型计算值和实验结果非常接近，其平均卡H剥误莘绝大部分小于 10％，说明所建数学模 型能较好地对聚乙烯酣降解酶发酵过程进行模拟 。 关键词：聚乙烯醇 降解酶 发酵过程 模拟 中图分类号：TQ018；X783．1 文献标识码：A 聚乙烯醇 (PVA)是一种人工合成的水溶性高分子聚合物，广泛应用于粘合剂、造纸和纺织工 I等领 域，因而成为工业废水中污染物之一。PVA在 自然环境中很难降解，而酶法降解 PVA生物分解性好，因 此受到广泛的关注…。PVA降解酶是一种新型的酶制剂，不同的酶可以相互配合以催化 PVA降解 。我国 近几年关于 PVA的生物降解主要集中在 PVA降解酶生产菌的筛选 。【和发酵条件优化 等方面。国际上对 PVA降解过程巾的关键酶进行了分离纯化及基因的克隆表达，深入研究了PVA的降解机理，并对相关酶 进行了酶学性质及应用研究 -8]，但 PVA降解酶产生菌种类不多，培养周期长，提取较困难，酶活不高， 阻碍了PVA降解酶的应用，迄今关于 PVA降解酶的T业化生产的报道很少。鉴于此，为了给聚乙烯醇降 解酶发酵生产及工业化应用提供基础数据，本工作利用Matlab软件对假单胞菌PseudomonasspXT11．Z90S 发酵生产聚乙烯醇降解酶的菌体生长、底物 PVA消耗和聚乙烯醇降解酶合成等过程进行了模拟研究。 l实验部分 1．1培养过程 培养基的组成 (-0-位g／L)为PVA1．0，酵母膏 0．5，(NH4)25041．0，K2HPO40．5，KH2PO40．5，MgSO47H20 0．2，FeSO47H2O0．01，NaC10．1，用NaOH溶液调节其 pH值为7．0。 种子培养：在250mL角瓶中装入30mL培养基，将斜面菌种接入培养基中，在30℃~u2oor／rain条件 下培养48h。 发酵培养：在500mL=角瓶中装入100mL培养基，取6mL种子培养液放入新鲜培养基中，在30℃ ,n2oor／min条件下培养72h。 I．2分析方法 1．2．1菌体生长过程跟踪分析 在菌种发酵培养过程中每隔4h从三角瓶中取一定量发酵液，取0．5mL，用水稀释lO倍，采用UV752 紫外可见分光光度计测其在600nm处的吸光度，记为OD600 。 收稿日期：2010．I2-27：修订 日期：201I．03．31 作者简介：千能~t5强r (1978一)，男，01师。E-mail：wang_ 780214@126corn 基金项目l湖瑚省教育厅资助科研项I=1(No09C380) I10 化学反应工程与工艺 20l1年4月 1．2．2PVA含量测定 在菌种发酵培养过程中每隔4h从三角瓶中取一定量的发酵液，采用Finley法[9,103测其中的PVA含量。 1．2-3降解酶酶活测定 在菌种发酵培养过程中每隔4h从三角瓶中取一定‘量的发酵液，在5000r／min~条件下离 C,,20min，收 集上清液，即为粗酶液，根据参考文献[Il】的方法测降解酶酶活。每小时吸光度下降O．00l所需的酶量定义 为一个酶活单位 ，U。 2结果与讨论 2．I菌体生长过程模拟 菌体生长动力学模型的建立是菌体生长过程模拟的关键。