06年病理生理学实验指导.doc

第一部分 病理生理学教学实验的目的和要求 一、概述 病理生理学是一门医学基础理论学科，是研究疾病发生、发展和转归规律的科学。病理生理学研究包括动物实验、流行病学调查、临床资料分析总结及临床研究等，后者应以不损害病人健康，不耽误病情，不增加病人痛苦与经济负担为原则，并应严格遵循相关法律规定在患者自愿、知情的前提下进行。由于临床研究受到众多条件的限制，以动物实验和其它体外实验的方法（如体外用培养细胞、离体器官进行研究）进行病理生理学研究是人们认识疾病和对疾病建立有效诊和防治方法的主要手段，所得资料是进行临床研究的重要依据。因此，动物实验是各种临床研究的基础。 为了深入揭示疾病发生、发展的机理，必须人为地严格控制实验条件，在动物身上复制近似人类疾病的模型，并对实验动物的行为和（或）各种生理、生化指标进行及时、客观、仔细的观察、记录和分析。在实验动物所获得的资料必须与人类疾病的表现作比较、分析，从中发现疾病发生、发展的规律，而且可以通过实验性治疗和预防，为临床疾病的防治提供理论依据。病理生理学实验也包括利用已建立的某一疾病的动物疾病模型，进行防治措施的研究，这属于“实验性疾病防治学”的范畴。 病理生理学教学实验以动物实验为主，实验方法分为： 1．急性实验：于短时期内在动物制备疾病模型，观察造病动物的行为、功能和代谢的变化；另外，不需要严格无菌，操作比较简单方便。这种方法适用于某些病程较短的疾病复制，或用于观察疾病过程中某一阶段的改变。 但急性实验也存在一些不足：如观察时间短，实验的结果常不够全面；手术创伤或麻醉等因素对实验结果有一定影响。所以，急性实验结果常需要慢性实验与临床研究加以校正。 2．慢性实验：在接近自然生活条件下，对动物施加短期或长期性损伤性因素，对疾病过程中机体的行为、功能和代谢变化进行较长期的观察（数周、数月或数年）。其研究结果可靠性较高，适用于疾病整个过程或慢性疾病病理过程的实验研究。 慢性实验的不足：观察时间长，实验设备和技术要求高，人力物力投入较大；短时间内得不出实验结果。 在病理生理学教学中用于学生作为印证性实验时，多采用急性实验。 二、科学实验的基本规律 有关科学实验的基本规律是一个涉及范围十分广泛问题，现主要介绍在建立动物模型进行实验研究方面应遵循的基本规律。 1．动物选择 模型的可复制性、经济、种系、年龄（体重）、性别、健康状况，雌性应注意是否怀孕等。 2．实验模型类型 整体、器官、组织或细胞。 3．动物模型的要求 与人类病理变化的相似性；模型的标准化（可重现性）；经济和可得性；可靠性和一定的特异性。尤其在药效观察实验上，在动物实验获得反应或结果应与人类中的情况相一致。 4．对照 设立对照的目的不仅在区分正常与病理两类状况，而且在于严格单因素条件，使实验结果稳定，减少各种干扰因素的影响。对照通常有：①同体对照：为实验动物自身实验前后或造成疾病模型前后有关指标或数据的对比；②异体对照：为按照统计学方法用配对、配组的方法进行实验，也就是用另一个或另一组健康和生理情况（如年龄、性别、体重等）相似的同种动物作为实验的对照；③不完全对照（参考资料或他人的结果）。 在对照设立过程中，在所谓相同条件下的实验，其“相同条件”只是相对的概念，所以为避免误差需要建立一定样本数（动物数）的实验组，实验组中的动物数“越多越好”，但过多不但存在经济问题，还存在实验时间、人力等方面的限制。因此，超过实验能力的过多样本处理可能会扩大结果的差异性。在许多情况下要适当地分批作相同的实验，这时要考虑尽可能缩小批间出现的实验结果方面的差异。 一般，组内的样本数在10-20左右。而且不应减少对照组的样本数。 5．观察指标 是指动物实验中动物整体、器官乃至组织细胞在实验因素作用下代谢、功能和结构发生变化的特征性观察要素。 （1）观察指标按其性质可分为： ①功能性指标：如血压、呼吸、心率、心电图、体温及全身状况等。 ②代谢性指标：如血液中PaO2、PaCO2、pH、SB、BE、NPN、血尿肌酐、血氨浓度等测定。 ③形态结构性指标：根据形态改变来判断组织的损伤程度，如肺水肿、肾坏死等是否存在，用微循环显微镜观察休克时微循环的改变。 （2）观察指标按其记录方式可分为： ①主观指标：如不同缺氧症时，肉眼观察的血红蛋白颜色上的差异，也是记数指标（见实验四）；PT时间的测定，有主观因素的影响，也属于记数指标（见实验五） ②客观指标：如血气分析的检测结果，或3P试验时分析沉淀有几个“(”，均属于测量指标（见实验五）。 观察指标的确定应注意特异性；客观性；可重复性；灵敏性；试剂、设备和技术的可能性；公认性（凡新建立的方法必须对方法的特异性、灵敏性、准确性进行鉴定得到公认）。 6．实验记录和结果分析 原则上，实验记录应当及时、全面、准