弗氏不完全佐剂.ppt

佐 剂概述 必须具有以下条件 无致癌性，也不应是辅助致癌物质，不能促进肿瘤的形成； 无毒性，肌肉或皮下注射均安全； 化学纯； 吸附力强； 易于吸收； 不含有与人体或动物体有交叉反应的抗原物质； 佐剂不应引起对其本身的超敏感性，也不应与血清抗体结合而形成有害的免疫复合物； 佐剂疫苗经1-2年保存应当稳定不变质，效力无明显改变，不引起任何不良反应。 佐剂的分类 不溶性盐类胶体佐剂 油乳佐剂 内容提要 灭活的概念 常用的灭活剂 甲醛的使用浓度 一般需氧细菌用0.1%-0.2%的浓度； 厌氧菌则多用0.4%-0.5%杀菌或脱毒； 处理时间37-39?C 24h以上，有的需要更长时间。 例如猪肺疫灭活苗，用0.1%的甲醛溶液，在37-38?C条件下灭活7-12h；气肿疽灭活苗，用0.5%的甲醛液，37-38?C灭活72-96h，而破伤风类毒素用0.4%甲醛液，在37-38?C条件下灭活21-23天。 甲醛用于病毒灭活其浓度可在0.05%-0.4%范围内，大部分使用0.2%-0.3%。 (二) 苯酚 （三）结晶紫 (四) 烷化剂 影响灭活作用的因素 二、影响冻干保护剂效能的因素 冻干保护剂 （protector） 二、影响冻干保护剂效能的因素 三、常用的冻干保护剂 (三) 灭活剂浓度 以甲醛为例，甲醛浓度越高，灭活脱毒越快，但抗原损失量亦较大。 (四) 温度 温度越高，灭活越快，灭活作用随温度上升而加速。在低温时，温度每上升10?C，细菌死亡率可成倍增加。每升高10?C，金属盐类的灭菌作用增加2-5倍，石炭酸的杀菌作用增加5-8倍。但是，如果温度超过40?C 或更高，对微生物的抗原性将有不利影响。 (五) pH 在微酸性时灭活速度慢，抗原性保持较好，在碱性时灭活速度快，但抗原性易受破坏。灭活初期损失较快，以后逐渐减慢。 如对细菌的灭活作用，pH有重大影响，pH改变时，细菌的电荷也发生改变，在碱性溶液中，细菌带阴电荷较多，所以阳离了表面活性剂的杀菌作用较大。在酸性溶液中，则阴离于的杀菌作用较强。 (六) 微生物含氮量 一般微生物或毒素的总氮量和氨基氮含量对灭活有一定影响。 一般含氮量越高，甲醛等灭活剂的消耗量就越大、灭活脱毒越慢。 (七) 有机物的存在 被灭活的疫苗中，如果含有血清或其他有机物质，会影响灭活剂的灭活能力。因为环境中的这些蛋白质等有机物吸附于灭活剂的表面或者和灭活剂的化学基团相结合。受这种因素影响最大的为苯胺类染料、汞制剂和阳离子去污剂。 表3-1 常用灭活剂及灭活方法举例 38?C，21-31天 0.4%甲醛 破伤风明矾沉降类毒素 37?C，18天 细胞毒原液:结晶紫甘油为3:1 (结晶紫甘油含2.5%结晶紫) 猪水泡病细胞毒结晶紫疫苗 36?C，7天 组织苗:石炭酸甘油溶液为1: 4 (60%甘油及1%酚蒸馏水) 狂犬病羊脑组织 37-38?C，6-8天 血毒:甘油结晶紫为 4:1 (1000ml甘油+2.5g结晶紫) 猪瘟结晶紫疫苗 20-37?C，72-20h 0.2%AEI或0.02%BEI 口蹄疫细胞培养灭活苗 37?C，24h 0.5%甲醛 犬传染性肝炎灭活苗 4-10?C，冷库内7天 0.15%甲醛 牛、羊伪狂大病疫苗 37?C，20-24h 0.4%甲醛 鸡传染性法氏囊病组织灭活苗 37?C，24h 0.05%甲醛 犬瘟热肝脾组织灭活苗 37?C，l8-24h 0.25%甲醛 猪丹毒、猪肺疫氧氧化铝二联苗 37?C，24-48h 0.3%甲醛 羊大肠杆菌病菌苗 37?C，10天 0.8%甲醛 肉毒梭菌(C型)菌苗 灭活和毒方法 灭活剂及其浓度 疫苗名称 冻干保护剂 一、保护剂的组成与功用 三、常用的冻干保护剂 又称稳定剂（stabilizer）或分散剂。 冻干保护剂是指在冻干过程中及其后使制品的活性物质免受破坏的一类物质。 一、保护剂的组成与功用 生物制品冻干保护剂通常由以下三类物质组成： 1．高分子物质 2．低分子物质 3．抗氧化剂 1．高分子物质 主要起骨架作用，防止低分子物质的碳化和氧化； 保护活性物质不受加热的影响； 使冻干制品形成多孔性、疏松的海绵状物，从而使溶解度增加。 高分子物质范围很广，种类甚多。诸如白蛋白、血清、明胶、脱脂乳、液体培养基、淀粉、酵母浸膏以及聚乙烯吡咯烷酮等合成聚合物。 2．低分子物质 低分子物质包括糖类和氨基酸类，前者如葡萄糖、乳糖、蔗糖、棉于糖等，后者如谷氨酸、天门冬氨酸、精氨酸、赖氨酸等。 低分子物质可产生均匀的混悬液，使