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RNAzol Reagent 总RNA提试剂目录号：试剂盒组成、储存、稳定性： 试剂盒组成 RNAzol （4℃避光 ml 200 ml 储存事项： 在室温下能稳定保存12个月。尽管如此，为达到最佳效果，我们建议保存在2~8°C的环境下。 重要提示： 产品介绍： RNAzol该方法对少量的组织(50-100mg)和细胞(5×106)以及大量的组织(≥1g)和细胞(107)均有较好的分离效果。 注意事项： 后入氯仿之前，°C下可放置一个月以上。保存在75%乙醇中的RNA沉淀，2-8°C可以保存一周，-20°C条件下可以保存1年。RNA半衰期比较短，容易降解，建议提取后尽快进行后续实验，如反转录成cDNA，Northern Blot等。 若下游实验对DNA非常敏感，建议用 RNase free DNase I（货号：RN45）对RNA进行处理。 自备试剂：氯仿、异丙醇（新开封或提取RNA专用）、75%乙醇(用DEPC处理过的水配制)RNA抽提操作步骤：（实验前请先阅读注意事项） 提示：用RNAzol 抽提RNA时要戴手套和护眼罩。避免接触皮肤和衣服。在化学通风橱完成操作。避免呼吸道吸入。如无，所有的操作应该在在15~30°C的条件下。匀浆 动物组织：取新鲜或-70℃冻存动物组织尽量剪碎，每30-100mg组织加入1ml RNAzol，匀浆仪进行匀浆处理。或在液氮中研磨后加入RNAzol 1ml混匀。注意：样品体积一般不要超过RNAzol体积的10%。 单层培养细胞：尽量去除干净残留培养液后直接往直径3.5 cm的培养板中加入1ml 的RNAzol解细胞。依据培养板的面积而不是依据细胞的数量来决定所需的RNAzol 量（每10cm2加1ml）。当RNAzol 量不足时可导致抽提的RNA中污染有DNA。在RNAzol 试剂中用移液管反复吹打来裂解细胞。每5~10×106的动物细胞，植物或酵母菌细胞或每1×107细菌加1ml的RNAzol。在加入RNAzol 前应避免洗涤细胞，因为那样会增加mRNA降解的可能性。破裂某些酵母菌和细菌可能需要使用匀浆器。 ，将匀浆样品在条件下5分钟以使核蛋白体完全解。可选： 在°C的条件下以12,000的离心力离心10分钟，蛋白质，脂肪，多糖或肌肉，植物的块茎。沉淀中包含有细胞外膜，多糖，以及高分子量DNA，含有RNA。脂肪组织的样品，大量应除。。每1ml RNAzol加0.2ml氯仿。盖紧管盖，15秒并将其在下2~3分钟。在°C 12,000 rpm的离心力高速冷冻离心15分钟。离心后混合物分成三层：下层，中间层，上层无色的水样层。RNA无一例外地存在于水样层当中。水样层的容量大约为所加RNAzol 容量的60%。 将水样层转移到一干净的管中，异丙醇。10分钟RNA沉淀在离心前通常不可见，管底。 在°C 12,000 rpm 离心10分钟。在°C 12,000 rpm离心分钟μl RNase free water，充分溶解RNA，得到的RNA保存在-70℃，防止降解。 注意：沉淀不要过分干燥，以免难于溶解。 【生物】- 3 - 北京金百特生物技术有限公司 订货：010 Q Q ：253042134 【生物】