胡鑫-2014微生物学大实验.pptVIP

实验原理 菌种保藏的方法很多。其原理却大同小异，不外乎为优良菌株创造一个适合长期休眠的环境,即干燥、低温、缺乏氧气和养料等。使微生物的代谢活动处于最低的状态，但又不至于死亡，从而达到保藏的目的。依据不同的菌种或不同的需求，应该选用不同的保藏方法。一般情况下，斜面保藏、半固体穿刺、石蜡油封存和砂土管保藏法较为常用，也比较容易制作。 微生物菌种的保藏 试剂与器材 1、材料 各种需要保藏的菌种及相应的培养基、河砂、瘦黄土或红土。 2、试剂 EDTA、NaAc、10mmol/LTris、液体石蜡、甘油、五氧化二磷、95%乙醇、10%盐酸、无水氯化钙、食盐、干冰。 3、器材 无菌吸管、无菌滴管、无菌培养皿、安瓿瓶、冻干管、40目与100目筛子、油纸、滤纸条、干燥器、真空泵、真空压力表、喷灯、L形五通管、冰箱、 微生物菌种的保藏 斜面低温保藏 这是一种常用的而且是最简便的保藏方法。首先将要保藏的菌种移接到适宜的斜面培养基上。一般采用营养丰富的半合成培养基，如PDA培养基，麦芽汁琼脂培养基等。为了减少培养基水分蒸发，延长保藏时间，可将琼脂用量加到20%。在这些培养基中，最好再加入少许0.2%的K2HP04、KH2PO4、CaCO3等缓冲剂，以中和菌种在保藏过程中产生积累的有机酸。 用适宜温度培养至菌丝长满斜面，选择菌