鹅源新城疫病毒ZJ1株微型基因组构建及其初步应用.pdfVIP

鹅源新城疫病毒ZJ1株微型基因组构建及其初步应用.pdf

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卷 期 ! # 微 生 物 学 报 ’( )! 1’ ) # 年 月 $%% $ !#$ %’()(*(+$ ,-$ *+,-./-0 $%% !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 鹅源新城疫病毒!# 株微型基因组的构建及其初步应用 张艳梅 刘玉良 黄 勇 贾立军 刘秀梵 (扬州大学 农业部畜禽传染病学重点开放实验室 扬州 $$%%2 ) 摘 要:在获得鹅源新城疫病毒 株全基因组序列的基础上,用增强型绿色荧光蛋白( )报告基因取代鹅源 HI# +5*J 新城疫病毒HI# 株整个编码区,只保留与病毒复制、转录和病毒粒子包装相关的调控序列,将其反向克隆入转录载 体 ( )中,构建了该毒株的微型基因组。当转染用辅助病毒 株感染的 细胞时报告基因得到表 883K % L% HI# MN:$ 达,表明此微型基因组 可被辅助病毒提供的 、和 蛋白翻译。同时将该病毒 、和 蛋白基因分别克 K1O 1J J P 1J J P 隆入真核表达载体 中,构建了表达该病毒 、与 蛋白的辅助质粒,用此微型基因组对辅助质粒的表达 NQ6:D+’ 1J J P 产物进行了功能鉴定并对该病毒拯救过程中痘苗病毒的最适感染剂量进行了摸索。以上研究为该病毒的成功拯 救及开展其它相关研究奠定了基础。 关键词:新城疫病毒,微型基因组,病毒拯救 中图分类号: 文献标识码: 文章编号: ( ) R372 O %%%#:9$%2 $%% %#:%%3$:% [,] 新城疫( , )是由新城疫病毒 毒拯救体系4 ! 。 1+SC/TU(+ BT+/T+ 1V ( , )引起的禽类的一种烈性 本研究所选用的新城疫病毒 HI# 毒株是$%%% !#$%’( )*% +*,- 1V 传染病。1V 为单股负链不分节段的K1O 病毒,其 年从浙江发病鹅群中分离到的强毒株,目前我室已 [] 基因组全长为 ##79DU 或 ##2$DU ,基因组结构模式 经完成了该毒株生物学特性鉴定 ,首次获得该毒 [] 9 为: ,分别编码以 株基因组全序列 。本研究构建了该毒株的微型基 4W:P+/B+-:1J:J:X:*:M1:P:8-/(+-:W 下

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