HBV、HCV高精度核酸检测技术的临床意义.pptVIP

主要内容 Part Ⅰ 荧光定量PCR技术简介 Part Ⅱ HBV/HCV核酸检测技术现状及进展 Part Ⅲ 临床对HBV/HCV检测技术的需求 Part Ⅳ HBV/HCV高精度检测技术对肝病诊疗的临床意义 Part Ⅰ PCR技术简介 PCR技术简介 PCR技术简介 PCR技术简介 PCR技术简介 PCR技术简介 PCR技术简介 PCR技术简介 PCR技术简介 PCR技术简介 Part Ⅱ HBV/HCV核酸检测技术现状及进展 HBV/HCV核酸检测技术现状及进展 HBV/HCV核酸检测技术现状及进展 HBV/HCV核酸检测技术现状及进展 HBV/HCV核酸检测技术现状及进展 Part Ⅲ 临床对HBV/HCV检测技术的需求 Part Ⅳ HBV/HCV高精度检测技术对肝病诊疗的临床意义 不同方法的HBV DNA检测下限以及不同标准要求 比较项目 检测下限 线性范围 备注 卫生部要求 1000IU/ml 1000IU/ml-1E8IU/ml 常规煮沸法 500IU/ml 500IU/ml-1E8IU/ml 手工操作 圣湘磁珠法 10IU/ml 20IU/ml-2E9IU/ml 手工操作 罗氏磁珠法 12IU/ml 30IU/ml-1.1E8IU/ml 需要罗氏全自动核酸提取工作站 美国肝病协会建议 10IU/ml 推荐罗氏HBV试剂 HBV/HCV核酸检测技术现状及进展 ☆国内大部分检测试剂灵敏度≥1000Copies/ml，特异性、准确性等方 也存在着严重缺陷，远远不能满足临床检测和用药监控的需求，这也是国内HCV研究进展缓慢的重要原因之一。 HBV/HCV核酸检测技术现状及进展 “2008年美国肝病协会CHB防治指南”：持久消除HBV是乙肝的治疗终点，HBV DNA病毒载量尽可能小于或等于10 IU/ ml。 临床对HBV/HCV检测技术的需求 “欧洲肝病研究学会EASL2010年指南”指出：采用荧光实时PCR方法检测HBV DNA时，其灵敏度要小于或等于10-15 IU/ ml。 临床对HBV/HCV检测技术的需求 “欧洲肝病研究学会EASL2011指南”还指出：丙肝患者治疗的终点是HCV RNA病毒载量低于50 IU/ ml。 临床对HBV/HCV检测技术的需求 研究表明国产PCR试剂的灵敏度很难达到上述要求 五种乙型肝炎病毒核酸荧光定量检测试剂盒的比较,中华传染病杂志，2009年 第3期 ——吴星,黄维金, 周诚 ,庄辉 等(中国药品生物制品检定所,北京大学医学部) 临床对HBV/HCV检测技术的需求 国内行业指导原则 国家SFDA技术审评中心《HBV DNA定量试剂技术审评指导原则》中指出： HBV DNA最低检测限应 ≤30IU/ml 临床对HBV/HCV检测技术的需求 国产很多乙肝PCR试剂的灵敏度为500IU/ml至1000IU/ml之间，丙肝试剂的灵敏度为在1000IU/ml以上。 从病毒性肝炎的早期诊断及适时确定治疗终点的临床需求看，现有的国产PCR试剂需要提高检测灵敏度。 国内现状 临床对HBV/HCV检测技术的需求 ≥ 100,000 10,000- 99,999 病 人 (%) 13年随访累积肝癌的发生率[1] (N = 3653) 50 40 30 20 10 0 1.3 1.4 3.6 12.2 14.9 13年随访累积肝硬化 的发生率[2] (N = 3582) 4.5 5.9 9.8 23.5 36.2 300 300- 999 1000- 9999 300 300- 9999 10,000- 99,999 100,000- 999,999 ≥ 1 million HBV DNA基线水平（copies/ml） HBV DNA基线水平较高增加肝硬化和肝癌的风险 HBV/HCV高精度检测技术对肝病诊疗的临床意义 持续高HBV DNA水平和肝癌发病增加相关 baseline HBV DNA 104 ≥ 105 ≥ 105 ≥ 105 随访HBV DNA -- 104 104 to 105 ≥ 105 调整参照 (95% CI) 1.0 (参照) 3.6 (1.7-7.6) 6.9 (3.4-13.8) 9.1 (5.8-14.1) P 值 -- .001 .001 .001 包括 ≥104 copies/mL (n = 1376) 0 2.0 x 103 4.0 x 103 6.0 x 103 8.0 x 103 1.0 x 104 1.2 x 104 1473 5882 8730 10108 肝癌发生率 每 100,000