高活性纤维素酶的分离纯化-中国农学通报.PDF

中国农学通报 2012,28(18):205-208 Chinese Agricultural Science Bulletin 高活性纤维素酶的分离纯化 李志平，杨 盛，侯红萍 （山西省农科院果树研究所，山西太谷030815） 摘 要：为了纯化纤维素酶粗酶液，通过采用硫酸铵分级沉淀、Sephadex G-100凝胶柱层析、DEAF FF 弱 阴离子交换柱层析的方法，研究纤维素酶粗酶液分离纯化的方法。结果表明：采用硫酸铵分级沉淀、 Sephadex G-100凝胶柱层析、DEAF FF 弱阴离子交换柱层析的方法对内切葡聚糖苷酶组分的分离纯化 有效。通过试验研究得到一种内切葡聚糖苷酶组分，其比活力提高了5.89倍，回收率为22%。 关键词：纤维素酶；混合菌；分离纯化 中图分类号：S6 文献标志码：A 论文编号：2012-0555 PurificationofHighlyActiveCellulase Li Zhiping, Yang Sheng, Hou Hongping (PomologyInstitute,ShanxiAcademyofAgriculturalSciences, Taigu Shanxi 030815) Abstract:To study the separation and purification of cellulase from crude enzyme, the method of ammonium sulfate fractionation, Sephadex G-100 gel filtration and DEAF FF weak anion exchange column chromatography method were used. The results showed that: the usage of ammonium sulfate fractionation, Sephadex G-100 gel column chromatography, DEAF FF weak anion exchange column chromatography was a efficient method to purify CMCase. The specific activity of CMCase increased 5.89 times purifed in this way, while the recovery rate was 22%. Keywords:cellulase; mixed strains; purification 0 引言 果树枝条中纤维素占植物干重的35%~50% ，利用 2 [1] 目前，中国苹果的种植面积约266.6 万hm ，每年 纤维素酶可以使纤维素被彻底分解 。纤维素酶是一 除了收获超过2100 万t 的苹果外，还有近1000 万t 修 种复合酶，主要由葡聚糖内切酶、葡聚糖外切酶和β-葡 剪下来的果树枝条，大量废弃的枝条，乱堆乱放影响村 萄糖苷酶等组成，还有很高的木聚糖酶活力，它的生产 容市貌，田间焚烧引起农作物、树木、房屋烧毁，烧死烧 对人类生存环境的改善和可持续发展有着举足轻重的 [3] [4]