2014届高考生物一轮复习（广东专用）课件：第十二单元　现代生物科技专题第1讲基因工程(人教版）.pptVIP

选修3 选修3内容在高考中约占8%，在选择题和非选择题中都有可能出现。一般难度较低，也有较低几率出现较难的题目，非选择题重点考查基础的操作过程和关键名词。常与必修内容联系在一起考查。 1．基因工程 重点关注：题目常以某技术成果为信息，多考查基因工程的基本工具和基本步骤，注意载体、质粒、启动子、终止子、标记基因等内容。 2．克隆技术 重点关注：植物组织培养的过程、各种植物激素的作用、克隆技术的实践意义。 3．胚胎工程 重点关注：胚胎工程的基本原理、胚胎工程的应用，注意各项操作的对象和注意事项。 第1讲 基因工程 一、基因工程的基本工具 1．“分子手术刀”——_________________ (1)来源 主要是从______________中分离纯化出来的。 (2)功能 能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中 部位的两个核苷酸之间的_____________断开，因此具有 。 (3)结果 经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：____________和_______。 2．“分子缝合针”——___________ (1)两种DNA连接酶(E·coli DNA连接酶和T4DNA连接酶)的比较 ①相同点：都缝合 键。 ②区别：E·coli DNA连接酶来源于 ，只能将双链DNA片段互补的___________之间的磷酸二酯键连接起来；而T4DNA连接酶能缝合 ，但连接平末端的效率_________。 (2)与DNA聚合酶作用的异同 DNA聚合酶只能将_____________加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键。DNA连接酶是连接__________________的末端，形成磷酸二酯键。 3．“分子运输车”——______ (1)作为载体必须具备的条件 ①能在__________中复制并稳定保存。②具有一至多个_____________，供外源DNA片段插入。③具有 ，供重组DNA的鉴定和选择。 (2)最常用的载体是_______，它是一种裸露的、结构简单的、独立于细菌染色体之外，并具有自我复制能力的双链环状DNA分子。 (3)其他载体：____________________________。 二、基因工程的基本操作程序 1．目的基因的获取 (1)目的基因是指________________________。 (2)原核基因采取___________获得，真核基因是___________。人工合成目的基因的常用方法有 和____________。 (3)PCR技术扩增目的基因 ①原理：_______________。 ②过程 第一步：加热至90～95℃，___________； 第二步：冷却到55～60℃，______________________； 第三步：加热至70～75℃，热稳定DNA聚合酶从______起开始促进互补链的合成。 2．基因表达载体的构建 (1)目的：使目的基因在受体细胞中__________并且可以______________，使目的基因能够_______________。 (2)组成：目的基因、_______、终止子、__________。 ①启动子：是一段有特殊结构的_________，位于基因的首端，是______________识别和结合的部位，能驱动基因______________，最终获得所需的_________。 ②终止子：也是一段有特殊结构的_________，位于基因的_________。 ③标记基因的作用：鉴定受体细胞中__________________，从而将______________________筛选出来。常用的标记基因是______________。 3．将目的基因导入受体细胞 (1)转化的概念：____________进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。 (2)常用的转化方法 ①将目的基因导入植物细胞：采用最多的方法是____________，其次还有_________和_______________等。②将目的基因导入动物细胞：最常用的方法是______________。此方法的受体细胞多是________。③将目的基因导入微生物细胞：原核生物作为受体细胞的原因是_______________________________________。最常用的原核细胞是__________，其转化方法是先用_______处理细胞，使其成为___________，再将_____________________溶于缓冲液中与感受态细胞混合，在一定的温度下促进感受态细胞吸收DNA分子，完成转化过程。 (3)重组细胞导入受体细胞后，筛选含有基因表达载体受体细胞的