生物技术第二章载体2学时.pptVIP

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  • 2017-05-23 发布于广东
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生物技术第二章载体2学时

第二节 基因工程载体 一般特征 质粒是染色体外能够自主复制的双链闭合环状DNA分子。 广泛存在于细菌中,某些蓝藻、绿藻和真菌细胞中也存在质粒。 它是一种裸露的比病毒更简单,有自主复制能力的DNA分子。 基因组长度:约为50kb的双链DNA分子,实际大小为48502bp。 DNA是线状双链分子带有单链的互补末端,末端长12个核苷酸,称为粘性末端,简写cos,12个碱基的序列为5-GGGCGGCGACCT-3。当噬菌体感染宿主细胞后,双链DNA分子通过cos而成环状。 中央片段,12kb~24kb,含PL控制red和gam基因。 λ噬菌体克隆载体的构建策略 ⑵ λ噬菌体载体的类型 两种类型: ①置换型 ②插入型 三、柯斯质粒 1978年Collins和Hohn构建一种新型的大肠杆菌克隆载体,命名为cosmid(柯斯质粒),又叫粘粒。 柯斯质粒(cosmid)= cos序列+质粒。 实际是质粒的衍生物,它是用正常的质粒同λ噬菌体的cos位点构成。 (四)酵母载体(yeast vector):略 酵母人工染色体(yeast artificial chromosome, YAC):可接受2Mb的外源DNA插入,是人类基因组计划物理图谱绘制采用的主要载体 PUC质粒作为基因克隆载体应有下列何种调控元件 ( A B C D

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