食用菌生产技术1第一章基因工程概论-调整-luose.pptVIP

基因工程 讲授人：刘柱明 2007.11 与基因有关的基础知识 1、生命的最小功能单位—细胞 2、遗传物质的载体—染色体(chromosome) 人类染色体图示 A-T  G-C DNA的双螺旋结构的形成 DNA双螺旋 真核生物染色体DNA组装不同层次的结构 4、遗传信息的基本单位—基因（gene） 5、遗传信息传递的中心法则 例：基因工程培育抗虫棉的简要过程 1、基因工程在医药卫生领域的应用 2、基因工程在农牧业、食品工业中的应用 3、基因工程在环境保护领域的应用 课后习题： 基因工程（genetic engineering） 也叫基因操作、遗传工程，或重组体DNA技术。一般说来所谓的基因工程是指在体外将核酸分子插入病毒、质粒或其它载体分子，构成遗传物质的新组合，并使之参入到原先没有这类分子的寄主细胞中内，而能持续稳定的繁殖。 二、基因工程（genetic engineering） 及其主要研究内容 基因工程 细胞工程 发酵工程 酶工程 蛋白质工程 生物工程 分（离目的基因） 切（割目的基因和载体） 接（连目的基因和载体） 转（化宿主细胞） 筛（选阳性克隆） 表（达目的基因） 基 本 步 骤 从复杂的生物有机体基因组中，经过酶切消化或PCR扩增等步骤，分离出带有目的基因的DNA片段； 在体外，将带有目的基因的外源DNA片段连接到能够自我复制的并具有选择记号的载体分子上，形成重组DNA分子； 将重组DNA分子转移到适当的受体细胞（寄主细胞），并与之一起增殖； 从大量的细胞繁殖群体中，筛选出获得了细胞重组DNA分子的受体细胞克隆； 从这些筛选出来的受体细胞克隆，提取出已经得到扩增的目的基因，供进一步分析研究使用； 将目的基因克隆到表达载体上，导入寄主细胞，使之在新的遗传背景下实现功能表达，产生出人类所需要的物质。 目的基因 基因载体 重组体 分 切 接 转 筛 表 步 骤 图解 pSC101 抗四环素 pR6-5 抗卡那霉素 DNA连接酶 重组DNA分子 EcoRI 抗卡那霉素基因 苏云金芽孢杆菌 提取 抗虫基因 与运载体DNA拼接 棉花植株 导入 1、基因工程的准备阶段 2、基因工程的问世 3、基因工程的快速发展阶段 三、基因工程研究发展史 1、基因工程的准备阶段 （1）理论基础 在40年代确定了遗传信息的携带者，即基因的分子载体是DNA而不是蛋白质，从而明确了遗传的物质基础问题。 在50年代明确了DNA分子的双螺旋模型和半保留复制机理，解决了基因的自我复制和传递的问题。 在50年代末期和60年代，相继提出了“中心法则”和操纵子学说，并成功的破译了遗传密码子，从而阐明了信息的流向和表达问题。 （2）技术基础 20世纪60年代末70年代初，限制性内切酶和DNA连接酶等的发现：使DNA分子进行体外切割和连接成为可能； 质粒改造成载体以携带DNA片段克隆； 逆转录酶的使用打开真核生物基因工程的一条通路。 2、基因工程的问世 1973年Cohen等首次完成了重组质粒DNA对大肠杆菌的转化，同时与S.Boyer合作，将非洲爪蟾含核糖体基因的DNA片段与质粒pSC101重组，转化大肠杆菌，转录出相应的mRNA。此研究成果表明基因工程已正式问世。 EcoRI Boyer 和Cohen的实验 pSC101 pR6-5 大肠杆菌 3、基因工程的快速发展阶段 自基因工程问世以来的这三十几年是基因工程迅速发展的阶段。如果说20世纪八九十年代是基因工程基础研究趋向成熟，那么二十一世纪初将是基因工程应用研究的鼎盛时期。 1、基因工程在医药卫生领域的应用 生产基因工程药品 用于基因诊断与基因治疗 2、基因工程在农牧业、食品工业中的应用 培育高产、稳产和具有优良品质的动植物新品种 培育具有各种抗逆性的动植物新品种 为人类开辟新的食物来源 3、基因工程在环境保护领域的应用 用于环境监测 用于被污染环境的净化 四、基因工程的应用 我国生产的部分基因工程疫苗和药物 （1）基因工程药品的生产 微生物生长迅速，容易控制，适于大规模工业化生产。如利用大肠杆菌生产胰岛素、干扰素、白细胞介素—2等。既增加产量，又降低成本。 胰岛素 1000 磅牛胰 10 克胰岛素 200 升发酵液 10 克胰岛素 干扰素 1200 升人血