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HPLC法测定皮肤丸中盐酸小檗碱的含量 作者：罗亦芬，程艳阳，谢友莲，黄爔乐，陈欣瑜 【摘要】 目的 建立皮肤丸中盐酸小檗碱的含量测定方法。方法 采用HPLC法，色谱柱为Welch Malerials XBC18柱，乙腈0.02 mol·L-1磷酸溶液(体积比2575)为流动相，流速为1.0 mL·min-1，检测波长为424 nm，柱温为35 。结果 盐酸小檗碱的质量浓度在3.814～38.14 μg·mL-1范围内与峰面积线性关系良好;平均回收率为99.1%，RSD为0.8%(n=9);最低检测限为0.942 7 ng。结论 本方法操作简便、结果准确，能有效地控制该制剂的质量。 【关键词】 皮肤丸;盐酸小檗碱;高效液相色谱法 　Abstract:Objective To establish an HPLC method for determining the content of berberine hydrochloride in Pifu pills. Methods A Welch Materials XBC18 column was used to analyze the sample by using acetonitrile0.02 mol/L phosphoric acid solution(25∶75)as mobile phase. The flow rate was 1.0 mL/min and detection wavelength was 424 nm. Results The standard curve for berberine hydrochloride was linear in the concentration range of 3.814～38.14 μg/mL. The average recovery was 99.1% with RSD 0.8% (n=9). Conclusion This method was simple,accurate and reliable for the quality control of Pifu pills. 　　Key words:Pifu pills; berberine hydrochloride;HPLC 　　皮肤丸由关黄柏、蛇床子、防风等组成，具有养血祛风、燥湿止痒的功效。为了更好控制该制剂的质量，通过查阅处方中各药材植化分析有关资料，选择对处方中主要药材关黄柏[1]中盐酸小檗碱的含量测定方法进行研究。在参照 文献 [1,2]的基础上，建立了本品中盐酸小檗碱含量测定方法。该方法操作简便、结果准确，能有效地控制该制剂的质量。 　 　1 仪器与试药 　　Agilent 1100型(VWD)高效液相色谱仪(美国);色谱柱为Welch Malerials XBC18;HN1006超声清洗仪(广州市华南超声设备有限公司);盐酸小檗碱对照品( 中国 药品生物制品检定所，批号110713200609);皮肤丸(自制，批号LB0024、LB0038、MB0016);盐酸、甲醇为分析纯;磷酸、乙腈为色谱纯;水为超纯水。 　 　2 方法与结果 　　2.1 对照品溶液的制备 　　取105 干燥5 h的盐酸小檗碱对照品适量，精密称定， 加1% (体积比) 盐酸甲醇溶液制成每 　　1 mL含8 μg的溶液，即得。 　　2.2 供试品溶液的制备 　　取本品粉末(过三号筛) 约1 g， 精密称定， 置50 mL容量瓶中，加1%(体积比)盐酸甲醇溶液约40 mL，超声处理(功率300 W，频率25 kHz)30 min，放冷，加1%(体积比)盐酸甲醇溶液稀释至刻度，摇匀，静置，取上淸液，用0.45 μm微孔滤膜，滤过，取续滤液，即得。 　　2.3 阴性对照溶液的制备 　　依照处方中的比例，按制法制备缺关黄柏的阴性对照样品，按供试品溶液的制备方法制备，即得。 　　2.4 色谱条件与系统适用性试验 　　以Welch Malerials XBC18为色谱柱;以乙腈0.02 mol/L磷酸溶液(体积比2575)为流动相;检测波长为424 nm。分别精密吸取缺关黄柏阴性对照溶液、对照品溶液与供试品溶液各10 μL，分别注入液相色谱仪，记录色谱图，见图1。结果表明：阴性对照不干扰，理论塔板数按盐酸小檗碱 计算 为10 412，相邻两峰的分离度为2.26，拖尾因子为0.89。 　　2.5 线性关系考察 　　取盐酸小檗碱对照品适量，精密称定，用1%(体积比)盐酸甲醇溶液制成每1 mL中分别含含3.814、7.628、19.07、30.51、38.14 μg的溶液，分别精密吸取10 μL，注入液相色谱仪，按“2.4”项下的方法测定，以质量浓度(ρ)为横坐