果树细胞悬浮培养研究进展.pdf

※农业科学 农业与技术 2017,VoL37,No．02 39 果树细胞悬浮培养研究进展 李海英 邵 静 张学明 郑亚杰 ’ (吉林省农业科学院果树研 究所 ，吉林 公主岭 136100) 摘 要 ：植物细胞悬浮培养是一种新型的培养技术，在育种、生产次生代谢产物和生物工程 中，具有广泛的应用。本文主 要分析 了植物细胞悬浮培养主要影响因素，并综述 了果树方面的研究概况，讨论 了今后发展前景。 关键词 ：果树；悬浮细胞；培养；研究进展 中图分类号：Q31 文献标识码：A 00I：10．11974n／yyjs．20170133039 愈伤组织状态如何，对细胞悬浮系的稳定情况具有 l 果树细胞悬浮培养研究概况 重要影响。愈伤组织可分为胚性愈伤组织和非胚性愈伤 组织。研究表明，只有胚性愈伤组织能成功建立胚性细 植物细胞悬浮培养最初用于草本植物，直到20世纪 胞悬浮系。张进仁等对幼嫩新鲜愈伤组织进行继代培养， 9O年代初，学界才在木本植物中应用的研究报道。例如， 结果发现该愈伤组织生长快、繁殖系数高，能够较好地 利用悬浮培养中国小叶杨，成功获得了悬浮细胞系并得 用于建立悬浮培养细胞系。 到再生植株： 2．2 细胞悬浮培养初始密度 1．1 悬浮培养体系建立方面 细胞在进行分裂和生长的时候，需要其内源代谢物 自1954年Muir等第 1次进行植物细胞悬浮培养以 质达到一定的阀值，只有在细胞初始密度与营养物比例 来，国内外在此方面已经取得了很大进展。Dhed’a等 合理，培养效果才能达到理想状态。周春江等对草莓悬 成功地由煮食蕉Bluggoe(Musaslap．ABB)建立起胚性细 浮细胞培养的研究表明，体积为40mL的悬浮细胞培养液， 胞悬浮系，并通过体胚发生途径获得再生植株。张进仁 以4~6mL接种量为宜。程江华在 150mL三角瓶中加入 等以锦橙试管苗下胚轴切段诱导愈伤组织，首次用细胞 25mL培养基，当接种量为3g鲜重时，石榴细胞增殖速 悬浮培养方法获得柑桔植株。陈崇顺对杏细胞悬浮培养 度快，增值倍数可达2．83倍，且细胞生长状态、分散性 进行了研究，结果表明，选用未木质化的外植体，提高 都比较好，但当接种量小于2g／25mL时，细胞生长速度 培养基中Ca(N03)、2,4一D和激动素的浓度，增加继代培 就会趋缓，而在大于4g／25mL时，不仅细胞生长速度减缓， 养次数，能快速得到 100％的脆散型愈伤组织，成功地 还会出现褐化现象。 建立其细胞悬浮培养系统。周玉萍等以基因型不同的香 2．3 摇床转速 蕉、大蕉和粉蕉吸芽茎尖培养产生的分生芽为外植体， 由于植物细胞体积大，细胞壁主要由纤维素组成， 不经过愈伤组织阶段直接由茎尖分生细胞，得到许多成 液泡 占到95％以上，对剪切力比较敏感，因而必须要 分单一、分裂能力强大的胚性细胞悬浮系。BLANDO等 控制好摇床的转速，一般控制在90~120ffmin内为宜 。 和 INFANTE利用悬浮细胞培养技术，来培养森林草莓叶 但涂艺声等认为草珊瑚的悬浮培养物最佳的摇床转速为 片愈伤组织，首次获得了再生植株。 40r／min，在 100r／min速度下振荡培养几乎难以存活。 1．2 果树育种方面 2．4 激素浓度 目前，植