平阳霉素三种成份对CHO细胞染色体畸变和SCE的影响.pdf

遗传 HFRFDITAS(Beijing) 8(2):28-301986 平阳霉素三种成份对CHO细胞染色体 畸变和SCE的影响 王钦南 费云标1)沈光平 宋海燕 （中国科学院遗传研究所，北京） 本文是继证实抗肿瘤药物平阳霉素(PYM) 瓶，用滴管轻轻地移出悬浮细胞，500g离心10 不仅能诱发高等植物染色体畸变+j［，而且也诱 分钟，沉降细胞以0.075MKC1于37℃低渗8 发哺乳动物染色体畸变，并提高其姊妹染色单 分钟。然后以3:1的甲醇冰醋酸固定两次，每 体交换 S（CE）频率f21的研究之后，再次通过染 次10分钟，冷冻法点滴制片，空气干燥。 色体畸变和SCE测试体系，进一步探讨了PYM 4．染色封片 将风千老化24小时以上 三种成份AA，和人对CHO-K1细胞染色体 的标本置人 1.0MNaH,PO4(pH8)的溶液中，在 畸变和SCE率的影响。 89℃的恒温水浴中解离10分钟，双蒸水冲洗 PYM和博莱霉素 (Bleomycin,BLM）都来 后以Giemsa溶液 3（毫升原液，97毫升双蒸水） 源于轮枝链霉菌属，其主要成份是由十多种主 20℃ 下染色3分钟，千燥后用加拿大树胶封 核相同、末端胺体各异的糖肤类化合物所组成 固。 的混合物。PYM和BLM都含有AA，和A6o 由于 BrdU参人DNA，使处理后第二周 前者的主要成份是AS，约占60多；后者的主要 期的子染色单体对 Giemsa染料着色较淡[167 成份是Aa，约占50-70务。，，。‘ 因此，PYM是 于是将处理后第一次和第二次分裂中期相细胞 属于博莱霉素族化合物。 欲查明PYM诱发染 清楚地区分开。结果在同一个标本上，可以分 色体畸变的特性，必须对它的各成份诱发染色 析两个周期的染色体畸变和SCE的图象[2［110 体畸变特性和SCE的频率，做更深人的研究。 结 果 和 讨 论 材 料 与 方 法 实验结果表明PYM三种成份A,,A，和A6 1．细胞培养 将对数生长的CHO-K1 皆可诱发哺乳动物染色体种种畸变 图［版110 细胞以2X10，细胞／毫升接种在含 10外小牛 其诱变能力是A6A,A,。 当各成份处理 血清的Eagle：培养液中，于二氧化碳培养箱内 液浓度为0.2pg/ml时，所诱发的染色体畸变频 (370c;）培养24小时待用。 率分别是：Ay:9%0o，As:12多，A6:15%；对 2．化学试剂 培养24小时的细胞分别 照组为2%。在试验浓度范围内，各处理组的 以含 10A[g/mlBrdU的0.2,0:4和 1.0,ug/mlA, 细胞畸变频率则随处理液浓度的升高而增加 A，和A6培养液处理12小时，以101zg/mlBrdU 表（1),诱发SCE频率也随处理液浓度的升高 处理组为对照。尔后各试验组再置含 10/zg/ml 而增加 表（2)0 BrdU的培养液中37℃下修复40小时。收获 Wang Qinnan “al.：Influence onChromosomal 前4小时加秋水仙胺，最终浓度为0.41Ag/ml, AberrationandSCEsinCellsbyThreeCompo- nentsofPingyangmycin 以期得到更多中期相。 1)现在中国科学院发育生物学研究所工作。 3.制备标本 材料处理完毕，摇动培养 本文于1984年9月28日收到0 28 裹1平阳舞素三种成份对CHO细胞染色体琦变的形响 处 理 染色体型畸变