白藜芦醇对结肠癌HT-29细胞的增殖抑制作用研究.pdfVIP

实验研究 自葱芦醇对结肠癌 HT-29 细胞的 增殖抑制作用研究 叶晓瑞 金黑鹰 2 (1.南京中医药大学第一临床学院，江苏南京 21∞23; 2. 南京中医药大学第三附属医院，江苏南京 210ω1) 摘要 目的 : 观察白笨芦碎对体外培养的人结肠疮 HT 29 细胞的精殖抑制作用 。 方法: 使用不同浓度白 笨芦盛事处理体外培养结肠癌细胞系 HT 29 后，运用细胞计数试，H:金检测法(CCK 8) 检测白笨芦辞对 HT 29 细胞生长的影响，流式细胞术( FCM) 检测白慈芦感对 HT 29 细胞凋亡率的影响。 结采 : CCK 8 法检溃l 豆示白慈 芦盛事对 HT 29 细胞的精殖有明显抑制作用，且在一定浓度范围内豆剂量依赖性(PO.OI ) 0 FCM 法检测结采提 示，与阴性对照纽比较，不同浓度的白慈芦碎可以提高 HT 29 细胞凋亡率(P0.05 ) 。 结论: 白笨芦碎对人结肠 癌 HT 29 细胞的精殖有抑制作用，且能诱导 HT 29 细胞凋亡，是一种高效低毒的药物 ， 其具体机制有待进一 步探讨。 关键词 白笨芦碎 HT 29 细胞细胞凋亡 细胞士曾殖 结肠癌细胞株 实验研究 中图分类号 R735.35 文献标志码 A 文章编号 1672 397X(2017)01ω76 03 白葱芦醇( resveralrol , Res) 是一种重要的植 消化传代。 当细胞生长状态稳定，呈对数生长期时 物抗毒素，存在于多种天然植物中，具有抗突变、 用于实验。 抗氧化等多种生物活性i 飞近年来，国内外许多研 2.2 CCK-8 法检测 HT-29 细胞增殖反应 将对数 究发现臼葱芦醇对多种癌细胞具有明显的抑制作 生长期的细胞消化计数，以 5∞0 个/孔的密度将 用仰，并且具有低毒、无诱变性等优势。 本实验拟探 细胞铺入 96 孔板中，培养 24h ，换无血清培养基 讨白葱芦醇对人结肠癌细胞株 HT-29 的体外增 液，加 l%BSA 替代血清，试验组按照不同浓度梯 殖抑制作用，为臼葱芦醇防治结直肠癌提供实验 度 125 、62.5 ， 31.25 、 15.625 、 7.8125问ImL 加入白葱 依据。 芦醇，阳性对照组加入等体积 10问ImL 的 5-FU ， 1 实验材料 空白组加入等体积培养基，药物作用 24h 、48h 和 结肠癌细胞系 HT-29 购自美国 ATCC 公司;牛 72h 后进行 CCK-8 检测，弃去培养液，每孔加入 血清白蛋白( BSA) 、培养基 RP阳1640 均购自 GIBCO 10μL 的 CCK-8 溶液，继续培养 物，吸去上清液后 公司;细胞计数试剂盒(cell coun Ling Kil-8 ,CCK-8) 置于空气振荡器上振荡 10min ，以酶标仪测定 购自上海日本同仁研究所;Annextin V- FITCIPI ~用 450nm 下的吸光值(D450nm) ，根据吸光值算出抑 亡试剂盒购自凯基生物公司;白葱芦醇购自美 制率。 国 Sigma 公司;流式细胞仪购自 BD 公司 ;C02 细胞增殖抑制率(%)=(1 -Res 作用细胞 培养箱购自 THERMO 公 司;低速离心机购自 D450nml对照、细胞 D450nm)x1∞% 2.3 流式细胞仪检测白黎芦醇对 HT-2