6.2 基因工程及其应用.ppt

豆科植物的根瘤能够固定空气中的氮 蜘蛛能够吐出蛛丝 资料三 以往，治疗糖尿病的胰岛素是从动物胰腺中提取的，从100千克猪、牛等动物的胰腺只能提取3－4克胰岛素，治疗一个患者需宰杀40－50头牛，这种药物的造价就可想而知了。 限制性核酸内切酶（限制酶） 分布：主要在微生物中。 特点：专一性和特异性，即识别特定核苷酸序列，切割特定切点。 结果：产生黏性未端（碱基互补配对）。 举例：大肠杆菌的一种限制酶（EcoRⅠ）能识别GAATTC序列，并在G和A之间切开。 DNA连接酶 连接酶的作用：将互补配对的两个黏性末端连接起来，使之成为一个完整的DNA分子。 ？如何让大肠杆菌生产人胰岛素？ * 第6章 从杂交育种到基因工程 第2节 基因工程及其应用 学习目标 ? （1）简述基因工程的基本原理。 ? （2）举例说出基因工程在农业、医药等领域的应用。 ? （3）关注转基因生物和转基因食品的安全性。 资料一：目前，全球的氮肥生产耗费世界总电力的3%-4%，且农作物只能吸收氮肥的1/10,造成了大面积土壤和水质的污染。 资料分析 资料二：蛛丝是自然界最奇特的物质之一，它具有极强的韧度，其韧度是同样直径钢材的好几倍。但与家蚕不同，蜘蛛不能家养，因为它们会互相吞食，所以不可能建立人工饲养蜘蛛的农场。30多年来，科学家们一直试图找到利用其他生物体来制造蛛丝的办法。 微生物有分泌产物，且微生物繁殖速率快. 设想一 能否让禾本科的植物也能够固定空气中的氮？ 能否让细菌“吐出”蛛丝？ 设想二 能否让微生物产生出人的胰岛素、干扰素等珍贵的药物？ 设想三 经过多年的努力，科学家于20世纪70年代创立了可以定向改造生物的新技术——基因工程。 活动一：（5分钟） 阅读课本P102-103页，然后回答下列问题： 1、什么是基因工程？其遵循的遗传学原理是什么？ 2、基因工程在什么水平上进行操作？ 3、基因工程需要哪些基本工具？ 4、基因工程的操作步骤有哪四步？ 按照人们的意愿，把一种生物的某种基因提取出来，加以修饰和改造，然后放到另一种生物的细胞里，定向的改变生物的遗传性状。 基因重组 限制性核酸内切酶（限制酶）、DNA连接酶、运载体。 分子水平的设计和施工 1）提取目的基因 2）目的基因与运载体结合 3）将目的基因导入受体细胞 4）目的基因的检测与鉴定 DNA的一段序列 EcoRI识别序列 2、基因工程的工具 (1) 基因的剪刀 限制性内切酶 G A A T T C G C T T A A （黏性末端） （黏性末端） P P P P A T C G P 4 1 3 5 2 o P 4 1 3 5 2 0 P P A C T G 磷酸 脱氧核糖 反向平行 含氮碱基 DNA的平面结构 限制酶的切割位点 一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列，并在特定的切割点上将DNA 分子切断。目前已发现的限制酶有200多种。 ？ 基因进行了切割以后就有了切口， 怎样才能将有切口的基因与其他基因缝合在一起呢？ (2) 基因的针线 DNA连接酶 G A A T T C G C T T A A (3) 基因的运输工具 运载体 ②作用： ③ 运载体具备的条件： ① 常用的运载体：质粒、噬菌体和动植物病毒 注：限制酶与连接酶作用的位点都是 磷酸二酯键 将外源基因导入受体细胞中 大肠杆菌 DNA 质粒 （环状DNA分子） 控制质粒DNA转移的基因 抗生素抗性基因 利用质粒将外源基因运载入受体细胞中 ① 常用的运载体：质粒、噬菌体和动植物病毒 目的基因的检测与鉴定 （1）为什么要检测？ 能够摄入重组DNA分子的受体细胞很少。 （2）怎样检测？ 受体细胞是否表达了标记基因所控制的特有性状 （3）目的基因表达了吗？ 通过特定性状的产生与否来确定目的基因是否表达 基因操作的基本步骤 ①从细胞中分离出DNA ① ② ③ ④ ⑤ ⑥ ②限制酶截取胰岛素基因 ③分离大肠杆菌中的质粒 ④构建重组DNA分子 ⑤将重组DNA分子导入大肠杆菌 ⑥培养大肠杆菌提取胰岛素 当堂训练 右图是将人的生长激素基导 入细菌D细胞内，产生“工程 菌”的示意图。所用的基因运载 体为质粒A。若已知细菌D细胞 内不含质粒A，也不含质粒A上 的基因，质粒A导入细菌后能正常表达。 ?(1)图中利用A和B产生的C称　　　　　，它通常在体外完成，完成此过程使用的工具酶有　 　　　　　　。 ??(2)在导入完成后得到的细菌，实际上有的根本没有导入质粒，有的导入了普通质粒，只有少数导入的是C。所以在基因工程的操作步骤中必须要有