石墨烯修饰电极上的电化学及DNA氧化损伤检测.pdfVIP

第31卷 第2期 应 用 化 学 Vo1．31Iss．2 2014年 2月 CHINESEJOURNALOFAPPLIEDCHEMISTRY Feb．20l4 8．羟基脱氧鸟苷在壳聚糖／石墨烯修饰 电极上的 电化学及 DNA氧化损伤检测 安玲玲。 路毛凤。 邓玲玲。 杜江燕 ” (南京师范大学化学与材料科学学院；江苏省生物功能材料重点实验室； 江苏省新型动力电池重点实验室 南京 210046) 摘 要 采用循环伏安(CV)、线性扫描伏安(LSV)和示差脉冲伏安 (DPV)等方法研究了8羟基脱氧鸟苷 (8-OHdG)在壳聚糖 (Chi)／石墨烯(GR)修饰的玻碳电极(GCE)上的电化学行为，8-OHdG在该修饰电极上氧 化峰电流与其浓度在3．5X10一一1．4X10 mol／L范围内呈良好的线性关系，检测限为6．4X10 mol／L (S／N=3)。将Chi／GR／GCE用于检测 DNA氧化损伤，8-OHdG在修饰电极上的氧化峰电流与损伤的DNA质 量浓度在 1O一300mg／L范围内呈 良好的线性关系，损伤DNA检出限为0．026mg／L(S／N=3)。 关键词 羟基脱氧鸟苷，壳聚糖，石墨烯，DNA氧化损伤 ，电化学检测 中图分类号 ：0657．1 文献标识码 ：A 文章编号：1000-0518(2014)02-0200-06 DOI：10．3724／SP．J．1095．2014．30179 衰老的自由基学说认为，衰老是 自由基引起组织损伤的结果。自由基对生物体具有多种损伤作用， 其作用机制主要涉及 DNA的氧化损伤。8一羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)是活性氧 自由基，如羟基 自由基、单 线态氧等氧化DNA分子中的鸟嘌呤碱基第8位碳原子而产生的一种氧化性加合物 引，是DNA氧化损 伤的主要产物，因此被认为是DNA氧化损伤的生物标志物 。8-OHdG的产生被认为与基因突变、致 癌、衰老等密切相关，在人群和动物实验中发现，当接触氧化剂时其体内的8-OHdG含量会增加_6J。已 有研究证明，人体内8-OHdG的含量与人类肝癌、肺癌、子宫肌瘤和乳腺癌等发生有关 7-10]。8-OHdG的 检测方法 目前较为常用的有高效液相色谱-电化学检测器分析法 (HPLC—ECD) j、气质联用分析法 (GC．MS)141、酶联免疫吸附法 (ELISA) 、毛细管电泳．电化学检测法 (CE．ECD) 以及 电化学方 法_l等。电化学方法因其具有快速、方便及所需仪器廉价等优点具有独特的优势。 石墨烯(GR)是 目前已知的导电性能最出色的材料 ，其优异的导电性能和宏观隧道效应使其成 为固定化生物分子和电极之间有效的电子传导体。此外，石墨烯具有良好的生物相容性和较大的比表 面积，有利于生物大分子活性的保持及生物敏感膜的固定，因此，其在生物传感领域有广阔的应用前 景 J。壳聚糖(Chi)是一种天然多糖，由于其良好的生物相容性、无毒和可生物降解等优点，被广泛应 用于药物制备 J、药物输送 和基因传递 等。壳聚糖结构中带有一NH：，可与8-OHdG中的一0H形 成氢键，且壳聚糖具有一定的粘性，将其修饰于电极表面，可改善8-OHdG在电极表面的固定效果。 目前，还未见用壳聚糖和石墨烯共同修饰玻碳电极检测8-OHdG的文献报道，本文通过吸附法制备 了壳聚糖和石墨烯修饰的玻碳 电极，研究了8-OHdG在修饰 电极上的电化学行为。此外，讨论了该修饰 电极对DNA氧化损伤的检测，为电化学方法用于DNA氧化损伤检测提供实验依据。 1 实验部分 1．1 仪器和试剂 CHI760C型电化学工作站(上海辰华仪器有限公司)；JSM一5610LV型扫描电子显微镜 (日本电子公 司)；KQ3200DB型数控超声波清洗器 (昆山市超声仪器有限公司)。8-OHdG标准品(美国Sigma公司)； 2013-04—12收稿 ，2013-06—17修回，2013-08-22接受 江苏高校优势学科建设工程资助项 目(164320H106) 通讯联系人：杜江燕，教授；Tel：025Fax：025E—mail：dujiang