葡萄糖淀粉酶复合纳米纤维膜的制备及酶学性质.pdfVIP

第32卷 第 12期 应 用 化 学 Vo1．32Iss．12 2015年 12月 CHINESEJ0URNAL0FAPPLIEDCHEMISTRY Dec．2015 疏水性聚丙烯酸／聚乙烯醇／葡萄糖淀粉酶 复合纳米纤维膜的制备及酶学性质 隋春红 王 程 韦雨清 翟 欢 李 楠 董顺福 韩丽琴 (吉林医药学院 吉林 吉林 132013) 摘 要 利用混合静电纺丝将葡萄糖淀粉酶(GA)固定于聚丙烯酸(PAA)／聚乙烯醇(PVA)纳米纤维膜上， 并通过鉴定固定化GA的酶学特征检验PAA／PVA可否成为一种优良的酶固定化载体。对其理化性质和酶学 特征进行鉴定，经红外光谱 (Fr—IR)和扫描电子显微镜 (SEM)表征发现，GA可成功包埋于PAA／PVA纳米纤 维膜内部；对包裹固定的GA进行酶学性质鉴定，发现固定化GA的最适反应温度为68℃，比游离GA提高了 9℃；固定化GA的适用pH值范围明显变宽；热稳定性和存贮稳定性显著增强且可以重复使用。PAA／PVA 纳米纤维膜是一种优 良的酶固定化载体 ，可以通过混合静电纺丝包埋法简便地将蛋白质分子固定于其内部 ， 具有一定的应用前景。 关键词 静电纺丝；纳米纤维膜；葡萄糖淀粉酶 ；包埋法；固定化 中图分类号：0632 文献标识码：A 文章编号 ：1000-0518(2015)12—1364-07 DOI：10．11944／j．issn．1000-0518．2015．12．150143 酶的固定化技术是现代酶学工程中的一种重要方法及手段，酶被固定于载体后既能保持其原有的 高催化效率、专一性及温和的反应特性，又能表现出较高的稳定性、产物易于分离纯化的特点 。固定 化酶还可多次重复使用，在生产实践中具有利用率高、操作连续可控等多种优点，因此在生物、医药、食 品、医学及生命科学等相关领域得以迅速发展_2J。经过数十年的研究发展，固定化酶技术已经比较成 熟，而性能优异的载体材料的研发已成为固定化酶技术最为活跃的研究方向之一。固定化酶载体材料 要求具有较大的比表面积，不溶于水，机械刚性和稳定性强，能防止微生物降解，最好还要无毒、无污染、 成本低廉、来源丰富 。 在诸多纳米材料中，静电纺丝法制备的纳米纤维膜十分符合作为固定化酶载体材料的特点，是一种 优 良的酶固定化载体，而且制备成本低、工艺简单 J。纳米纤维膜包埋法是一种已经比较成熟的酶固定 化方法，其原理是通过静电纺丝技术，在制备纳米纤维膜的过程中直接将酶纺入纳米纤维内部，从而实 现酶的固定化，这种原位固定酶的方法具有操作简单、载酶量大、酶活力损失少等优点 。本文采用静 电纺丝法制备聚丙烯酸 (polyacrylicacid，PAA)／聚乙烯醇 (polyvinylalcohol，PVA)／葡萄糖淀粉酶 (glucoamylase，GA)复合纳米纤维膜，通过共价交联方法使纤维薄膜具备疏水性的特点，达到固定化和 重复多次使用的目的，同时鉴定固定化GA的酶学特征，为进一步研究新型固定化酶载体材料提供依 据。 1 实验部分 1．1 仪器和试剂 H-7500型场发射环境扫描电子显微镜 (SEM，日本HITACHI公司)；Magna560型傅里叶红外光谱 仪(fTr．IR，美国NICOLET公司)，其扫描范围为4000—400ClTI～；UV-2550型紫外．可见分光光度计 (日 本SHIMADZU公司)；高压静电纺丝装置(吉林大学化学学院自组装)；振荡培养箱(上海精密仪器仪表 公司)。聚丙烯酸 (PAA，M =450000)购于阿拉丁试剂公司；聚乙烯醇(PVA，聚合度 175±50)购于安徽 2015．o4．15收稿，2015-06-23修回，2015-09-25接受 吉林省教育厅 “十二五”科学技术研究项 目(吉教科合字[2013]第354号)、吉林省科技厅(20150101131jc)资助 通讯联系人：隋春红 ，副教授；Tel：0432E—mail：suichunhong@163．com；研究方向：纳米材料 第 12期 隋春红等：疏水性聚丙烯酸／聚乙烯醇／葡萄糖淀粉酶复合纳米纤维膜的制备及酶学性质 皖维高新材料股份有限公