表面活性剂和染料探针共振光散射法测定蛋白质.pdfVIP

第24卷第 11期 化 学 研 究 与 应 用 Vo1．24，No．11 2012年 11月 ChemicalResearchandApplication Nov．，2012 文章编号：1004-1656(2012)11—1624-05 表面活性剂和染料探针共振光散射法测定蛋白质 张亚南，冯素玲 (河南师范大学化学与环境科学学院，河南 新乡 453007) 摘要：在pH为2．1的Britton．Robinson缓冲溶液中，蛋白质与十二烷基磺酸钠和吖啶红作用形成聚集体，导致 体系产生较大的共振散射光(RLS)强度，并且 RIS的增强程度与蛋白质的浓度呈线性关系，据此建立了测定 蛋白质含量的方法。人血清白蛋白(HSA)和牛血清 白蛋 白(BSA)分别在 0．03—3．0txg／mL和0．2—7．0g／ mL的浓度范围内与增强的共振光散射强度有 良好 的线性关系，相应的检测限分别为 0．0l19~g／mL和 0．026p．g／mL。对体系的反应机理进行了讨论。将方法用于人血清 中蛋白质含量的测定，并将分析结果与考 马斯亮蓝法进行了对照。t检验证明，两种方法无显著性差异。 关键词：共振光散射 ；吖啶红；十二烷基磺酸钠；蛋 白质 中图分类号：0657．3 文献标识码 ：A Determination ofproteinwith surfactantand dyeprobeby resonancelightscatteringtechnique ZHANG Ya—nan，FENG Su—ling’ (CollegeofChemistryandEnvironmentalScience，HenanNormalUniversity，Xinxiang453007，China) Abstract：Itisofundthatsodium dodecylsulfonateandacridineredcombinewithproteintoform anaggregateatpH2．10．Itresults inasignificantenhancementoftheresonancelightscattering(RLS)，andhteenhancementdegreeofRLSislinearwihttheconcen· trationofprotein．Basedonit，amethodfordetemr inationofproteinhas beendeveloped，differentproteinsandtheenhancementof RI~havegoodlinerarelationshipintherangeof0．030～3．0 g／mLofrhumanserumalbumin，0．20—7．0 g／mLofrbovineserum albumin．thecorrespondingdetectionlimitsrae0．O1191xg／mL和 0．026~g／mLrespectively．Thereactionmechanismofsystem is discussed．Themethodisusedofranalyzingproteininhumanserum，andthedetectionresultsarecompraedwiththoseofCoomassie brilliantbluemethod，hterearenosignificantdifierencesbetweentwomethodsaccordingtothet-tesL Keywords：resonancelightscattering；acridinered；sodium dod ecylsulfonate；protein 蛋白质检测技术的发展在许多领域都有重要 在蛋 白质的分析方法中，广泛使用共振光散 意义，如生命科学、临床医药、生化分析和食品质 射探针 m和荧光探针 ．4实现蛋 白质 的检测。 量检