生物制药学——第六章吸附分离法.ppt

第一节 吸附的基本原理 吸附法（adsorption method）：指利用吸附作用，将样品中的生物活性物质或杂质吸附于适当的吸附剂上，利用吸附剂对活性物质和杂质间吸附能力的差异，使目的物和其他物质分离，达到浓缩和提纯目的的方法。 吸附剂—在表面上能发生吸附作用的固体 吸附物—被吸附的物质 正吸附，负吸附。 实验室吸附柱层析 工业吸附分离设备 吸附法的特点 优点： (1)设备简单、操作简便、价廉、安全。 (2)少用或不用有机溶剂，吸附过程中pH变化小，较少引起生物活性物质的变性失活。 缺点： (1)天然吸附剂性能和吸附条件较难控制。 (2)收率不高。 (3)选择性差。 适合在大体积料液（稀溶液）中提取含量较少的目的物。 一、吸附作用 吸附：物质分子在两相界面上浓度的增加。 由于界面上的分子同时受到不相等的两相分子的作用力，因此界面分子的力场是不饱和的，即存在一种固体的表面力，它能从外界吸附分子、原子或离子，并在吸附剂表面附近形成多分子层或单分子层。 物理吸附与化学吸附 三、影响吸附的因素 1、吸附剂的特性 2、吸附物的性质 3、吸附条件 4、吸附物浓度与吸附剂用量 1. 吸附剂的特性 理想的吸附效果：吸附量大、吸附速度快、选择性强，流速适宜、吸附均匀。 种类、颗粒度、孔径、制备活化方法、机械强度 2.吸附物的性质 1）表面张力 2）极性 3）溶解度（是否解离） 4）分子量 5）形成氢键 3.吸附条件 温度：吸附热越大，温度对吸附的影响越大；影响吸附物溶解度。 pH：可控制吸附剂或吸附物解离情况。 盐的浓度：对不同物质的吸附有不同的影响。 溶剂的影响：单溶剂吸附，混合溶剂解吸附。 4.吸附物浓度与吸附剂用量 吸附物浓度 选择性：蛋白质、酶1%以下； 活性炭脱色和去热原（稀释） 吸附剂用量： 考虑收率和成本。 第二节 常用吸附剂 按吸附剂化学结构可分为两大类： 1、有机吸附剂：如活性炭、淀粉、聚酰胺、纤维素、大孔吸附树脂等； 2、无机吸附剂：如白陶土、氧化铝、硅胶、硅藻土、碳酸钙等。 在工业生产中常用的吸附剂有活性炭、白陶土、氧化铝、硅胶、大孔吸附树脂等。 常用吸附剂应具备的条件 较强的吸附能力，即有较大的比表面积 不与吸附物质及其它介质发生化学反应 有良好的机械强度和热强度 易再生不易劣化 具有商业性生产规模和比较低廉的价格 一、活性炭 一种吸附能力很强的非极性吸附剂。 种类：粉末活性炭、颗粒活性炭（锦纶活性炭） 特点： 优点：比表面积大（在 500～1500m2/g）， 吸附量大；抗酸耐碱，化学和热稳定性高；解吸容易；价格低，来源广。 缺点：很难标准化，结果不易重复；易污染环境。 活性炭的制备 766型颗粒活性炭吸附CoA： 二、活性氧化铝 特别适用于亲脂性成分的分离。 特点： 价廉，再生容易，活性易控制； 操作不便，手续繁琐，处理量有限。 有碱性、中性和酸性之分。 氧化铝的活性与含水量的关系很大。 活性氧化铝的制备 活性氧化铝为无定形的多孔结构物质。一般由氢氧化铝脱水制得。不同类型的氢氧化铝在空气中加热脱水生成不同晶型的氧化铝，如下： 三、硅胶 是一种坚硬无定形链状和网状结构的硅酸聚合物颗粒，属极性吸附剂。 层析用硅胶 SiO2. nH2O 比表面积在300 ～ 800 m2/g左右。 吸附活性强弱和自由水的含量有关。 活化后的硅胶极易吸水而降低活性。 既能吸附非极性化合物，也能吸附极性化合物。 CoQ10制备 四、人造沸石 人造沸石是结晶铝硅酸金属盐的水合物，其化学通式为：Mx/m[(AlO2)x·(SiO2)y]·zH2O M代表阳离子，m表示其价态数，z表示水合数，x和y是整数。 沸石分子筛活化后，水分子被除去，余下的原子形成笼形结构，孔径为3～10?。 是一种强极性吸附剂 人造沸石吸附细胞色素C 磷酸钙凝胶 种类：磷酸钙、磷酸氢钙、羟基磷灰石 [Ca5(PO4)3.OH] 吸附机理：Ca2+与蛋白质负电基团结合。 实际应用：浓磷酸直接加入氢氧化钙溶液中，或者将磷酸盐溶液加入氯化钙溶液，生成磷酸钙凝胶，吸附沉淀蛋白质。 用途：蛋白质的分离、精制 胰岛素纯化： 白陶土（白土、陶土、高岭土） 天然白陶土和酸性白陶土。