镁离子转运蛋白CORA间质结构域删除分析.pdfVIP

维普资讯 ISSN 1000-0054 清华大学学报 (自然科学版)2008年 第 48卷 第 6期 36／38 — — CN 11—2223／N JTsinghuaUniv(SciTech)，2008，Vo1．48，No．6 1057—1O61 镁离子转运蛋白CorA间质结构域删除分析 孙 占华， 王世珍， 黄 萱， 许 淼， 隋森芳 (清华大学 生物科学与技术系，生物膜与膜生物工程国家重点实验室，北京 100084) 摘 要：为了研 究CorA 的镁离子转运机理，对大肠杆菌 CorA是原核生物维持细胞镁离子平衡最为重 CorA 的间质结构域区进行了删除突变分析，并利用酵母突 要的镁离子转运系统之一u吨，其 同源蛋白广泛分布 变体互补技术进行 了突变体活性测定。以酿酒酵母质膜镁离 于真菌、酵母、植物和动物中。大肠杆菌(Escherichia 子转运系统敲除突变体菌株 CM66及其基因型对 照菌株 coli)及 鼠 伤 寒 沙 门 氏 杆 菌 (Salmonella CM52为宿主菌，建立了大肠杆菌CorA转运活性测定体系。 typhimurium)CorA均编码 由316个氨基酸残基组 结果显示：大肠杆菌CorA 间质结构域N一端起始的24个残 成的跨膜蛋白，仅具 8个氨基酸残基的差异 j。拓 基对于CorA在酵母质膜 中的表达或维持其本身正确构象 朴结构研究显示 鼠伤寒沙门氏杆菌CorA可以分为 发挥重要作用，CorAM 到D 段的部分残基在 CorA介 2个结构域：由约 235个氨基酸残基组成的N一端可 导的镁离子转运过程中起到重要作用。 溶性间质结构域 (periplasmicdomain，PPD)和 由3 关键词：分子生物物理学；镁离子转运系统；钴离子抗性等 个穿膜 a一螺旋组成的C一端跨膜结构域_4]，且可能 位基因(CorA)；间质结构域；删除分析 以同源寡聚体的形式来行使镁离子转运功能 j。 中图分类号 ：Q615 文献标识码 ；A 已有工作证 明：大肠杆菌CorA 的间质结构域 文章编号 ：1000—0054(2008)06—1057—05 片断具有Mg抖、Ni抖、Co抖结合活性，且其结合 ／ 解离常数 同大肠杆菌全长 CorA基本相 同。上述试 M utationanalysison periplasm icdomain 验证据均揭示：在大肠杆菌CorA的间质结构域区 ofmagnesium